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白癜风是一种常见的色素脱失性皮肤病,其病因及发病机制迄今尚未完全明确[1],在治疗上也较困难。目前大多数学者认为发病与自身免疫密切有关,自身免疫学说得到了越来越多的支持。白癜风在临床上有多种治疗手段,包括系统用药,局部用药,光疗、外科手术等,其中局部用药由于其直达病灶、副作用小等优点成为治疗白癜风的主要方式,近年来卡泊三醇治疗白癜风取得一定的疗效,但卡泊三醇在白癜风患者中起效的具体机制还不清楚,而近来也有研究发现活化CD8+T细胞上存在着高密度的VDR—维生素D3受体,提示1,25(OH)2D3可能有直接活化CD8+T细胞的免疫功能,而CD8+T细胞是白癜风自身免疫反应的主要效应细胞。还有研究认为白癜风可能与细胞因子的平衡失调有关,众多的细胞因子参与白癜风发病,如IL-6、TNF-a、IFN-γ等,他们通过诱导黑素细胞表面ICAM-1(细胞间粘附分子-1)的表达,而ICAM-1可以促进淋巴细胞与黑素细胞的黏附,从而导致黑素细胞的破坏。 目的 随访观察白癜风患者外用0.005％卡泊三醇-0.05%二丙酸倍他米松软膏治疗的疗效及安全性,及其疗效与型别、病期、病程、白斑面积、家族史、性别的关系。并探讨卡泊三醇对白癜风患者黑素细胞及皮损周边CD8+细胞毒性T细胞(CD8+CTL)增殖及其细胞因子分泌的影响。 方法 ①采用0.005%卡泊三醇-0.05%二丙酸倍他米松软膏外用每天两次,疗程12周。分别对患者在治疗前、治疗4周、8周和12周进行拍照以观察患者的复色情况,复色达76%–100%为最佳复色,51%–75%为良好复色,26%–50%为中等复色,<25%为轻微复色或无效。同时观察治疗过程中用药所产生的副作用。②体外培养白癜风患者皮损周围CD8+CTL,从白癜风患者正常皮肤吸疱培养黑素细胞,实验分三组:MC组,CD8+CTL组,黑素细胞与CD8+CTL共培养组,用细胞计数法检测卡泊三醇处理前后细胞数变化情况,采用ELISA测定卡泊三醇处理前后的细胞因子白介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素-γ(IFN-γ)分泌的变化;并使用细胞计数法检测泊三醇处理过的黑素细胞与CD8+CTL共培养组在添加与不添加抗人IL-6抗体时,黑素细胞及CD8+CTL的变化。 结果： ①31例白癜风患者局部外用0.005%卡泊三醇-0.05%二丙酸倍他米松软膏,治疗12周后,3个患者(9.7%)达到最佳复色,6个患者(19.4%)达到良好复色,8个患者(25.8%)达到中等复色,7个患者(22.6%)轻微复色。2个患者用药部位出现痤疮样丘疹,2个患者自觉瘙痒,患者均能耐受。进展期患者治疗效果优于稳定期(P=0.009),药物疗效与患者病程无显著相关性(P=1)。②在凋亡检测中,发现CD8+CTL与MC共培养中MC有显著凋亡。筛选10-8、10-9M浓度的卡泊三醇用于实验。在药物作用于共培养体系中,与未加药对照组相比,加药后MC组的MC计数无明显变化(P>0.05),而在MC与CD8+CTL共培养组中MC细胞数明显增加(P<0.05);并且在CD8+CTL组和黑素细胞与CD8+CTL共培养组中的CD8+CTL细胞数也明显增加(P<0.05)。与MC和CD8+CTL单独培养组相比,在MC与CD8+CTL共培养组中,其分泌的IL-6、IFN-γ和TNF-α显著减少,经10-9M浓度的卡泊三醇处理后的MC与CD8+CTL共培养组分泌的IL-6减少更加明显,与未加药相比其减少率有统计学差异(t=2.889,P=0.045),而IFN-γ和TNF-α在加药前后无明显变化(P>0.05)。在卡泊三醇处理过的共培养组中添加浓度为5mg/L的抗IL-6抗体后,黑素细胞显著增加,而CD8+CTL细胞减少,其差异具有显著统计学意义(t=-3.53,P=0.012;t=3.153,P=0.02)。 结论 0.005%卡泊三醇-0.05%二丙酸倍他米松软膏是一种安全有效的治疗白癜风的方法,在进展期效果更佳。卡泊三醇通过抑制炎症细胞因子IL-6的分泌,从而减少CD8+CTL对黑素细胞的杀伤,这可能是卡泊三醇治疗白癜风的机制之一。