【摘 要】
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该课题以对鞘翅目害虫,如西方五月鳃金龟、天牛、蛴螬等有明显优势的布氏白僵菌为出发菌株,首次克隆了布氏白僵菌类枯草杆菌蛋白酶Pr1基因全长cDNA,对其进行了序列分析及同源
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该课题以对鞘翅目害虫,如西方五月鳃金龟、天牛、蛴螬等有明显优势的布氏白僵菌为出发菌株,首次克隆了布氏白僵菌类枯草杆菌蛋白酶Pr1基因全长cDNA,对其进行了序列分析及同源性比较,并在大肠杆菌中得到了活性表达.根据布氏白僵菌Pr1基因全长cDNA序列设计引物,以含有Pr1基因的质粒pGEM-T-Pr1为模板,PCR扩增得到含有Pr1基因ORF序列的DNA片段.将该片段定向连接至大肠杆菌表达载体pBK-CMV的BamHI及HindⅢ位点,构建了重组质粒pBK-CMV-Pr1,并在E.coli XLOLR得到活性表达.该课题的研究工作为进一步开展对Pr1基因进行定向进化,筛选高酶活高抗性的Pr1基因突变体并最终构建高毒力高抗性的布氏白僵菌工程菌等菌株改良工作及布氏白僵菌致病机理的研究工作奠定了扎实的基础.
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