ROS对人胃癌MGC803细胞Rac1-Rock/Pak1-LIMK1-Cofilin-1通路的影响

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目的:研究罗格列酮(Rosiglitazone,ROS)对人胃癌MGC803细胞Rac1-Rock/Pak1-LIMK1-Cofilin-1分子通路表达的影响,探究罗格列酮抑制肿瘤迁移与侵袭的作用分子机制。方法:采用qRT-PCR检测ROS对人胃癌MGC803细胞Rac1、Rock、Pak1、LIMK1和Cofilin-1 m RNA表达水平的影响;采用Western blot检测ROS对人胃癌MGC803细胞Rac1、Rock、Pak1、LIMK1、Cofilin-1和P-cofilin-1蛋白表达水平的影响。结果:1.ROS对人胃癌MGC803细胞Rac1表达的影响qRT-PCR结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h后,与对照组比较Rac1 m RNA表达水平下调,差异有统计学意义(p<0.05)。Western blot结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h、24h后,与对照组比较Rac1蛋白表达水平下调,差异有统计学意义(p<0.05)。2.ROS对人胃癌MGC803细胞Rock表达的影响qRT-PCR结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h后,与对照组比较Rock m RNA表达水平下调,差异有统计学意义(p<0.05)。Western blot结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h、24h后,与对照组比较Rock蛋白表达水平下调,差异有统计学意义(p<0.05)。3.ROS对人胃癌MGC803细胞Pak1表达的影响qRT-PCR结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h后,与对照组比较Pak1 m RNA表达水平下调,差异有统计学意义(p<0.05)。Western blot结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h、24h后,与对照组比较Pak1蛋白表达水平下调,差异有统计学意义(p<0.05)。4.ROS对人胃癌MGC803细胞LIMK1表达的影响qRT-PCR结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h后,与对照组比较LIMK1 m RNA表达水平下调,差异有统计学意义(p<0.05)。Western blot结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h、24h后,与对照组比较LIMK1蛋白表达水平下调,差异有统计学意义(p<0.05)。5.ROS对人胃癌MGC803细胞Cofilin-1及磷酸化的影响qRT-PCR结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h后,与对照组比较Cofilin-1 m RNA表达水平无明显变化,差异无统计学意义(p>0.05)。Western blot结果显示ROS分别作用MGC803细胞6h、12h、24h后,与对照组比较Cofilin-1蛋白表达水平无明显变化,差异无统计学意义(p>0.05)。但P-cofilin-1的蛋白表达水平下调,表明ROS抑制了MGC803细胞Cofilin-1的磷酸化,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:1.ROS可下调Rac1,抑制Rock、Pak1、LIMK1的表达。2.ROS对Cofilin-1的表达无明显影响,但能减少其磷酸化水平。3.ROS可能是通过Rac1-Rock/Pak1-LIMK1-Cofilin-1这一信号通路抑制肿瘤迁移与侵袭。
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