【摘 要】
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背景:最近越来越多的研究表明,遗传因素与肩袖撕裂（RCT）的风险之间存在显著的相关性。在中国,对与RCT相关的易感基因多态性的研究有限。本病例对照研究旨在分析DEFB1、雌激素相关受体b（ESRRB）、成纤维细胞生长因子（FGFs）基因多态性与中国汉族RCT风险发生的相关性。方法:共招募100例RCT患者和116例健康人,并采集其外周血样本。对DEFB1、ESRRB和FGFs基因的19个SNP位点
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背景:最近越来越多的研究表明,遗传因素与肩袖撕裂（RCT）的风险之间存在显著的相关性。在中国,对与RCT相关的易感基因多态性的研究有限。本病例对照研究旨在分析DEFB1、雌激素相关受体b（ESRRB）、成纤维细胞生长因子（FGFs）基因多态性与中国汉族RCT风险发生的相关性。方法:共招募100例RCT患者和116例健康人,并采集其外周血样本。对DEFB1、ESRRB和FGFs基因的19个SNP位点进行基因分型,并进行遗传关联分析,包括单核苷酸多态性（SNP）、基因型分析以及连锁不平衡（LD）和单倍体。随后建立了一个多元逻辑回归模型来确定其独立影响因素。同时,我们分别构建了 DEFB1（CC）和DEFB1（GG）载体,分别转染兔肌腱干细胞。采用DNA下拉法和质谱技术筛选了两种不同基因型的差异结合蛋白,并进一步验证了这些结合蛋白的功能。结果:实验结果显示:rs4903399基因型在两组中存在显著差异（CC vs.CT+TT）（OR:0.49;95%CI:0.26-0.89;P=0.02）,rs11750845 与增加 RCT 的风险有关（CC vs.CT+TT）（OR:0.55;95%CI:0.31-0.96;P=0.04）,而 rs13317 与降低 RCT 的风险有关CC vs.CT+TT)（OR:2.64;95%CI:1.20-6.28;P=0.02）.rs4903399 的 CT 基因型两组存在显著差异（p=0.02）,优势模型表明rs4903399为RCT的独立影响因素（CC vs.CT+TT）（OR:0.40;95%CI:0.21-0.77;P=0.01）。rs13317 的优势模型趋势显著（CC vs.CT+TT）（OR:2.30;95%CI:0.98-5.41;P=0.05）,ESRRB 的 CTCCTCGA 与降低 RCT风险有关（OR:0.23;95%CI:0.06-0.86;P=0.02）,CTCCTTGA 则增加了 RCT 的风险（OR:4.70;95%CI:1.26-17.52;P=0.01）.在 FGF3 中我们发现,CAAG（P＜0.05）与 TGGA（P＜0.05）单倍体型均增加了患RCT的风险。同样,我们发现FGF10的CTCT单倍体型与 RCT 的发生显著相关（OR:0.64;95%CI:0.43-0.94;P=0.03）。在 DEFB1 的细胞实验里,我们发现DEFB1基因过表达能促进Scx、TNC、COL Ⅰ、COLⅢ等腱性标志物的表达,抑制OPN、Sox9成骨标志物的表达。同时,DEFB1的GG（野生型）比CC（变异型）更容易表达DEFB1。而其CC（变异型）通过与FUS靶蛋白结合能力减弱,从而影响DEFB1的表达。FUS蛋白能正向调节DEFB1的表达,进而促进Scx、TNC、COL Ⅰ、COLⅢ等腱性标志物的表达,抑制OPN、Sox9成骨标志物的表达,当FUS表达下调时,细胞染色显示钙化明显增加。结论:本研究结果证实了中国汉族人群中DEFB1、ESRRB、FGFs与RCT之间的相关性,为肩袖撕裂与基因多态性之间的关系提供了宝贵的证据,同时阐明了 DEFB1的基因多态性影响肩袖撕裂发生风险的发病机制。然而,此研究结果仍需要进一步的大样本和精心设计的实验来明确两者之间的相关性。
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