重组腺病毒系统(Recombinant Adenovirus System)是一种高效的基因传递和表达系统，被广泛运用于基因功能研究，癌症、遗传疾病的基因治疗及疫苗研究。十几年前，构建重组腺病毒载体还是一件耗时费力的工作，随着人们对腺病毒基因组结构和功能的深入了解以及分子克隆技术的不断发展和提高，多种不同的方法被用来构建重组腺病毒。目前已有多家公司推出了商品化的腺病毒表达系统，其中有代表性的有：Q-biogene公司的Adeno-Quest系统，Strategene公司的Adeasy系统，Clontech公司的Adeno-X系统等。 根据交配辅助遗传整合克隆方法的报道，本研究开发出了高效而大规模的的构建重组腺病毒的新系统。这个最新被报道的MAGIC系统利用细菌的结合转移，使得携带目的片段的供体质粒从供体菌转移到受体菌中。接着I-SceI被诱导表达，切割I-SceI位点，暴露出同源序列，然后red gam重组酶介导的重组发生。供体菌中有一个F因子转移系统，F因子是一个低拷贝的质粒，包含一个转移操纵子和顺式作用转移起始点oriT。当oirT被连入供体质粒，这个被修饰过的因子F’能够有效地迁移供体质粒，而并非F’因子自身。供体质粒必须含有条件复制起始点R6Kori，复制需要由基因pir1编码的反式激活因子或者是pir1-116。只有供体菌DH10B能够表达pir1-116，所以供体质粒只能够在DH10B中复制。在供体菌和受体菌混合之后，I-SceI被诱导表达，将目的片段从供体质粒上切下，也将填充片段从受体质粒上切下。另外，在菌株Bun21中的质粒pML300在鼠李糖的诱导下表达red gam重组酶。供体质粒和受体质粒的断裂大大提高了重组事件的发生。质粒pML300包含温敏复制起始点pSC102，而且在42℃不能复制。大体上，MAGIC只需要简单的细菌混合，能够大大的节约时间，精力和花费。因此，这个方法适用于高通量的DNA制备，功能基因组研究，也包括构建重组腺病毒。 这里报道的新的构建重组腺病毒是基于MAGIC的。该方法利用了位点特异性和高效的重组机制，即50bp同源的red gam重组酶，从而将外源片段整合到全长的腺病毒基因组上。该方法很快(只需要花费12-14天产生重组腺病毒)而且不会有亲本质粒的污染。在该研究工作中，构建了一个新的供体质粒pRTRA，它包含两个不同的50bp同源序列，和外侧的两个I-SceI位点。受体质粒pAd-pheS也包含两个不同的50bp同源序列，和内侧的两个I-SceI位点。重组事件被一系列严密的调控因子有效调节：阿拉伯糖诱导的内含子编码的稀有内切酶I-Scel，鼠李糖诱导的red gam重组酶。感兴趣的片段从pRTRA转移到受体载体pAd-pheS的效率是非常高的，高达100％。这个新的方法能被运用于高通量的构建重组腺病毒，也能被运用于构建腺病毒cDNA表达文库。 该方法避免了体外的操作，比如内切酶的切割，连接和转化，而且克隆效率高，无背景。这个方法已被证明适用于构建腺病毒的cDNA表达文库。总之，该新方法高效，较少的技术要求，不需要大的工作量，并且能运用于基因组研究和蛋白质组研究。