记忆缺失性贝毒（ASP）是有毒赤潮硅藻分泌产生的毒素，其主要活性成分软骨藻酸（domic acid, DA）是一种氨基酸类毒素。海洋贝类通过食物链的传递作用可在体内累积DA，人及海洋哺乳动物中毒之后，会干扰中枢神经系统，发生暂时性失去记忆甚至死亡。胶体金免疫层析技术（colloidal gold immunochromatographic assay,GICA）是以条状纤维层析材料为固相载体，通过毛细管作用原理，以胶体金为示踪物来显示结果的一种新型检测方法。该方法具有操作简单、快速、分析结果易于判断，无需任何仪器、成本低廉等优点，适用于现场批量检测。近年来，胶体金免疫层析技术己成为当今发展最快速的免疫学检测技术之一，在毒素检测等领域得到了广泛的发展。本研究采用单克隆抗体技术和胶体金免疫层析技术，制备快速检测软骨藻酸的胶体金免疫层析试纸条。取得了如下研究成果：1.软骨藻酸免疫抗原和包被抗原的制备采用活泼酯法，将软骨藻酸与载体蛋白钼孔血蓝蛋白（KLH）、牛血清白蛋白（BSA）进行偶联，制备了相应的免疫抗原DA-KLH和包被抗原DA-BSA，紫外扫描定性鉴定偶联成功，偶联比分别为1:25和1:16。2.软骨藻酸单克隆抗体的制备免疫抗原DA-KLH免疫BALB/c小鼠，利用杂交瘤细胞融合技术成功制备2株能稳定分泌抗软骨藻酸单克隆抗体的杂交瘤细胞株，抗体亚类分别为IgG1和IgG2a，通过体内诱生腹水法获得纯化后效价为1：64000的抗软骨藻酸单克隆抗体。3.胶体金及软骨藻酸金标抗体的制备采用柠檬酸三钠还原氯金酸法，成功确立了20nm胶体金的制备条件，并利用制备好的胶体金，对前述制备的抗软骨藻酸单克隆抗体进行了胶体金标记条件的摸索，成功确立了单克隆抗体的胶体金标记条件：最适pH是9.0，最适标记稳定量是9.72μg/mL胶体金，并制备金标抗体。4.软骨藻酸胶体金免疫层析试纸条的制备对软骨藻酸胶体金免疫层析试纸条的各项指标进行优化，并确立了最佳条件。最终选择SB06玻璃纤维素膜涂布4×稀释度的金标抗体构成胶体金结合垫；选择Millipore180 NC膜作为层析膜，羊抗鼠IgG（1mg/mL）和1μL包被抗原DA-BSA（0.867 mg/mL）喷涂在NC膜上，分别作为质控线和检测线；选用SB08玻璃纤维素膜作为样品垫；SX18吸水纸作为吸收垫；将胶体金结合垫、NC膜、样品垫和吸收垫组装成软骨藻酸胶体金免疫层析试纸条5.软骨藻酸胶体金免疫层析试纸条的应用对胶体金免疫层析试纸条的检测灵敏度、特异性和稳定性进行测试，结果表明，试纸条检测时间不超过15 min，检测灵敏度达20 ng/mL（对于贝类食品相当于8μg/g贝肉），可以满足国际规定的20μg/g的安全限值。特异性强、重复性好，4℃下可保存6个月。该方法灵敏度高、简单快速，无需特殊仪器设备，适用于广大基层单位的现场和批量检测，有着良好的商业开发应用前景。