自然杀伤细胞（Natural killer cell,NK）具有无MHC限制性和低移植物抗宿主反应风险等优势,在肿瘤免疫治疗领域（如白血病、淋巴瘤、乳腺癌等）具有广阔的应用前景。体外扩增后的NK细胞常需要运输到指定地点进行临床输注,因此,储运后NK细胞活力是影响其治疗效果的关键因素之一。现有的NK细胞储运方式主要包括液氮冷冻储运及4℃低温储运,上述储运模式均依赖于特定的保温设备,且冷冻运输成本高昂。此外,冷冻保护剂DMSO尚未被临床批准,且已有文献报道低温保存后NK细胞杀伤功能受损。而常温储运不再依赖费用高昂的低温保温设备和繁琐的冷冻程序,打破传统细胞运输的局限,成为了细胞短途运输的首选方式,但目前尚未见到可用于NK细胞常温储运的相关技术被报道。纳米纤维网络支架材料可为细胞提供3D微环境,改善细胞体外生存环境,从而为细胞保存提供了一种新思路。本文旨在以纳米自组装多肽材料为基础,开发一种无血清的、易于制备的NK细胞体外常温3D保存方法,提高NK细胞体外常温保存效果。首先,对NK细胞进行体外扩增以获得储运所需数量的NK细胞。其次,基于纳米自组装多肽材料实现了NK细胞常温3D保存,证实纳米纤维网络结构可支持NK细胞形成稳定的3D立体分布。随后,开展了NK细胞体外常温3D保存后的质量评价,包括:细胞数量、细胞存活率、细胞凋亡率、CD3-CD56+细胞亚群比例及细胞功能等。实验证实,多肽材料提高了常温保存条件下NK细胞的存活率、降低了NK细胞凋亡率并保持了较高的CD3-CD56+细胞亚群比例;同时,多肽材料提高了常温保存条件下NK细胞的细胞毒性以及分泌细胞因子的能力。综上,本文建立了一种NK细胞体外常温保存方法,明确了保护剂的成分为生理盐水、多肽、人血清白蛋白,并且证实纳米自组装多肽材料提高了NK细胞体外常温保存效果。