二翅蜉亚科(Cloeoninae)隶属于昆虫纲(Insecta)蜉蝣目(Ephemeroptera)四节蜉科(Baetidae),其稚虫多生活在静水水体,生态位特别。该类蜉蝣又因种类多、虫体小、成虫外部形态一致且分类特征较少等原因,一直是分类难点,我国种类报道不多。近几十年来,国际上对该类蜉蝣的研究已由成虫转向以稚虫为主,因此开展对我国种类成虫和稚虫的对应工作就显得格外重要。通过形态观察、室内饲养和DNA条形码技术,本文对采自我国大陆23个省市的二翅蜉亚科蜉蝣标本进行了成稚虫的对应和初步分类,共计述3属30种:其中有15新种,6个中国新记录种,1项新组合Procloeon simile comb.nov.(Eaton,1870),1项同物异名:浅绿二翅蜉Cloeon viridzlum Navas,1931(=皮氏二翅蜉Cloeon pielinum Navas,1933),另有17种在稚虫和成虫上成功对应。为了进一步了解二翅蜉的生活习性及与环境因子的关系,我们对浅绿二翅蜉Cloeon viridulum进行了将近一年的生态观察。研究表明,在6～9月份浅绿二翅蜉老熟稚虫数目最多,温度和食物是影响该种种群数量和分布的重要因素。蜉蝣稚虫的取食程度与栖息环境、种群数量、大小及季节变化密切相关。本研究还根据测得的细胞色素c氧化酶I(COI)基因部分序列计算了 K2P遗传距离,并利用邻接法和贝叶斯法构建了系统发生树。结果显示:二翅蜉亚科属间遗传距离为0.185～0.202,属内不同物种间平均遗传距离为0.099～0.159,种内不同个体间平均遗传距离为0.000～0.016。在系统发生树中,同物种不同个体均以较高支持率聚为一支,刺翅蜉属Centroptilum首先分出,而二翅蜉属Cloeon与原二翅蜉属Procloeon关系十分密切。