鱼类lbh-like和lrp2bp基因的表达及功能分析

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdlinux
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
下丘脑-垂体-性腺内分泌轴调控着鱼类生殖活动。开展鱼类下丘脑或垂体的转录组分析,从中筛选鉴定新的功能基因有助于揭示鱼类生殖内分泌的分子机制。在本研究中,我们从银鲫垂体转录组数据库中筛选获得一个新基因,由于它含有LBH结构域,因此命名为limb bud and heart-like(lbh-like)。它与斑马鱼中一个假想蛋白XP001336471具有78%的相似性,且主要在垂体、端脑、卵巢和眼中表达。银鲫lbh-like具有母源的mRNA,尾芽期开始合成合子转录本。免疫荧光定位分析表明,银鲫lbh-like蛋白分布于神经垂体上。  同时,我们在斑马鱼中克隆了银鲫lbh-like的同源基因,它同样表达于垂体、脑、卵巢和眼。我们通过显微注射morpholinos(MOs)的方法对斑马鱼lbh-like进行了功能分析。lbh-like敲降后导致促甲状腺激素tfhβ和下丘脑发育重要基因nkx2.1a的表达水平显著减少,暗示新基因lbh-like可能在鱼类内分泌活动中起着重要作用,其信号通路仍需进一步研究。  接着,我们研究了lbh-like在斑马鱼视网膜发育过程中的功能。lbh-like在斑马鱼中最早于受精后30小时开始表达,它表达部位主要为脑和视网膜。注射lbh-like MO敲降Lbh-like会抑制多种光受体特异基因,如opsins、gnat1、gnat2和irbp的表达。otx2是光受体发育过程中起决定性作用的一个基因,但它在这个过程中的具体调控方式仍不清楚。在受精后26小时,敲降Lbh-like不影响otx2的表达;在受精后32小时,此时lbh-like基因刚刚开始表达,敲降Lbh-like导致otx2的表达水平显著下调。但在受精后72小时,在注射lbh-likeMO的胚胎中,otx2的表达量显著高于注射空白对照MO的胚胎。同时,在lbh-like敲降的胚胎中,共注射otx2或其下游靶基因neuroD能够挽救视网膜中的缺陷。结合启动子荧光素酶实验结果,我们认为斑马鱼lbh-like是光受体分化过程中的一个新的调节基因,且它对光受体的调节是通过作用于otx2来完成的。此外,敲降lbh-like增加Notch信号通路基因的表达,从而破坏了光受体前体细胞增殖、分化和生存之间的平衡。  Lrp2bp(low density lipoprotein receptor-related protein2 binding protein)是低密度脂蛋白受体家族的成员之一,最早发现于人胎脑的cDNA文库,在脂类信号通路中发挥着重要作用。生物信息学分析显示,斑马鱼Lrp2bp蛋白含有TPR结构域,与其他脊椎动物的LRP2BP蛋白序列保守性较高。半定量RT-PCR结果显示斑马鱼lrp2bp特异地表达于成体精巢组织中。原位杂交和免疫荧光结果显示lrp2bp定位于精巢组织的间质细胞中。采用TALEN敲除技术,敲除lrp2bp获得三种突变体lrp2bp-/-(+19bp)、lrp2 bp-/-(Δ10bp)和lrp2bp-/-(Δ14bp),初步分析显示lrp2bp不影响精巢内部结构及精子形态,但它可能参与调控雄激素11-KT的产生。
其他文献
负荷预测是电力系统安全运行的基础和前提,也是电力部门安排调度计划、供电计划的重要依据。基于电力部门的市场化运行和日新月异的电力负荷需要,使得对短期负荷的预测性能提出
该文调查了广东地区黄守瓜在田间葫芦科植物上的分布情况;初步研究了黄守瓜在田间主栽黄瓜不同品种和葫芦科不同属的植物上的寄主选择性;重点研究了黄足黄守瓜对离体新鲜子叶
  本文应用同位素在体标记实验,结合气相色谱和气质联用分析方法,研究了上述两种昆虫及其种间杂交代雌蛾的性信息素生物合成途径;同时进行了外源脂肪醇及乙酸酯在棉铃虫、烟青
电力系统仿真计算是分析电力系统行为的基本依据和主要方法,而电力负荷的数学模型是搭建仿真的基础。随着分布式电源在电力系统配电网中的不断渗入,其对电力系统的影响也越来越严重,使得传统配电网的结构更加复杂,也给配电网综合负荷建模提出新的问题以及挑战。分布式发电因能量来源的不同包含光伏、风力、燃料电池发电等多种类型,将其大量接入配电网时,因不同类型分布式电源发电机理和特性的不同,对负荷模型的影响也各有差异
电力系统配电网的无功优化是保证配电网安全、经济运行的一项有效手段,是降低网损、提高电压质量的重要措施。因此,电力系统配电网无功优化问题的研究,既具有理论意义,又具有工程实际应用价值。配电网无功优化问题是一个复杂的非线性组合优化问题,至今未得到很好的解决。禁忌搜索算法是近年来出现的用于求解组合优化问题的一种高效的启发式搜索技术。本文采用固定并联电容器作为研究对象对配电网进行无功补偿,并利用禁忌搜索得
微逆变器与传统集中式逆变器相比,具有输入电压低、输出电压高、功率小、抗局部阴影能力强、安装成本低、使用寿命长等优点。因此,随着太阳能发电技术的发展以及技术的进步,使得微逆变器十分具有吸引力。目前,微逆变器技术在国内还处于初级阶段,所以研究光伏并网微逆变器状态监测系统具有重要意义。本文提出的光伏并网微逆变器状态监测系统是一个数据采集、数据传输、数据分析显示为一体的应用系统。该系统以单组微逆变器的运行
该试验对3个苦荞麦品种,即44个突变体和3个对照在不同生育期进行黄酮含量和一些生理、生化、形态指标的测定,旨在探明黄酮在不同时期、不同器官的含量以及形成的一些机理.研
杉木(Cunninghamialanceolata(Lamb)Hook)是我国亚热带常绿阔叶林区特有的重要速生用材树种,分布在我国南方的16个省(区),约占南方人工林面积的1/2,在我国森林蓄积量和木材生产
大草蛉(Chrysopa septempunctata Wesmael)属脉翅目,草蛉科,是我国农林害虫的重要捕食性天敌.其分布广,种群数量大,捕食多种害虫.大草蛉在害虫生物防治方面有着广阔的应用前
傣族医药是传统中医药的重要组成部分,是四大民族医药之一。通过长期的生活和医疗实践,傣族人民总结摸索出了许多诊疗治病的经验,发展出独特的医药体系。傣药资源中野生品种占绝