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目的:本实验应用活性维生素D和热量限制(Caloric Restriction,CR)对老龄大鼠进行干预,观察各组老鼠的生理状态及变化情况,体内诱导肝脏细胞发生自噬。检测老鼠细胞自噬活性的强弱以及自噬相关蛋白P62SQSTM1和维生素D受体VDR表达量的变化,为自噬的诱导及相关机制提供理论依据和实验支持。方法:32只雄性SD大鼠,月龄为18个月,随机分为四组:对照组(A组);维生素D组(B组,1ug·kg-1·d-1);热量限制组(C组,隔日限食);维生素D联合热量限制组(D组,限食方式同前),每组8只。A组给予正常饮食,及时加水,无干预。B组也给予正常饮食饮水,每日使用维生素D(1ug·kg-1)给老鼠灌胃干预,C组隔日限食,非限食期间给予充足的食物和水,D组隔日限食,非限食期间给予充足的食物和水,同时每日使用维生素D(1ug·kg-1)灌胃干预。喂养20周后,处死老鼠,取老鼠肝脏组织,切取小块组织制作电镜片,使用电镜观察肝脏细胞自噬情况,剩余肝脏组织使用Western blot检测P62SQSTM1、VDR蛋白表达变化,实验数据使用SPSS16.0统计软件分析处理。结果:1.维生素D和热量限制均可以诱导老龄大鼠肝脏细胞发生自噬,自噬活性较对照组增强。使用透射电镜观察可见,在自噬泡占胞浆面积比方面,对照组显著低于维生素D组、热量限制组和维生素D联合热量限制组,差异有统计学意义(p<0.05),自噬强度较弱。维生素D干预组和热量限制组在面积比方面差异不明显,即差异无统计学意义(p>0.05)。维生素D联合热量限制组的面积比高于对照组、维生素D组和热量限制组,差异均有统计学意义(p<0.05)。2.维生素D和热量限制可以有效降低蛋白P62SQSTM1的含量。使用Western blot分析检测发现,对照组肝脏细胞内蛋白P62SQSTM1含量高于其余三组,差异有统计学意义(p<0.05)。维生素D干预组和热量限制组肝脏细胞内蛋白P62SQSTM1的含量相较于对照组减低,且两者之间无差异,即差异无统计学意义(p>0.05)。在维生素D联合热量限制组肝脏细胞内蛋白P62SQSTM1含量均低于其余三组,差异有统计学意义(p<0.05)。3.维生素D对其胞内受体VDR的蛋白表达量并无明显影响。使用Western blot分析检测,维生素D联合热量限制组肝脏细胞内蛋白VDR表达量稍微有所增高,但无统计学意义(p>0.05)。对照组与维生素D组之间也无明显差异,差异无统计学意义(p>0.05)。结论:1.在老龄大鼠体内,维生素D、热量限制均可以诱导肝脏细胞发生自噬。2.维生素D、热量限制可以使蛋白P62SQSTM1的含量下降,为进一步理解蛋白P62SQSTM1在促进相关物质通过自噬方面的研究奠定了基础。3.维生素D在肝脏诱导细胞自噬与其受体VDR之间的关系尚不明确,仍需进一步研究。