基于动物实验探讨冷空气对心脑血管疾病影响的研究方法

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天气条件作为环境中变化最显著的因子,其变化常常会引起多种疾病的发生或加重。心脑血管疾病(Cardio-vascular Disease, CVD)就是一种受气象条件变化影响较大的疾病,主要包括脑梗塞、脑出血、高血压、冠心病(包括心肌梗死、心绞痛、供血不足等)。国内研究天气变化对人体心脑血管疾病的影响方法大都限于人群流行病学研究,其致病机制尚缺乏充分的实验证明和深入的探讨。作为国内医疗气象学研究新的研究手段,本文将在动物实验的基础上,探讨冷空气对心脑血管疾病影响的研究方法。主要包括以下几方面内容:(1)集合本次实验的要求和国家动物实验规范介绍了实验室的建设,包括实验的选址、建设类别和组成及布局。总结了饲养室建设过程需要控制的环境因素以及采取何种措施达到具体的要求,以及实验动物的模型的选择。(2)通过预实验确定了实验过程最佳麻醉药及麻醉的方式,阐述了如何观察动物麻醉后的各种反应以正确掌握麻醉药物的注射剂量;确定了采取直接测量血压的方法来测量动物的血压,以及如何才能又快又好地测量动物的血压;确定了最适合本实验的动物采血的方式,并介绍了采血过程中需要注意的事项;详细阐述了动物实验的过程,包括动物的编号分组、实验前的适应性饲养和冷空气模型的选择;确定了各分析指标的最佳检测时间点,提出应根据不同的冷空气模型设计不同的分组方式,确保在最佳时刻测得大鼠体内的各种激素水平。(3)去甲肾上腺素(Noradrenaline, NE)和血管紧张素Ⅱ (Angiotensin-Ⅱ, ANG-Ⅱ)采用酶联免疫吸附检测法(ELISA法)检测,总结了该检测方法中需重点注意的质量控制点。提出了影响ELISA实验的诸多因素,所用试剂及每一步的操作均可能影响到最终的检测结果。阐述了在进行ELISA操作实验过程中,需要严格执行的ELISA操作规程。提出了ELISA的操作规程也不一成不变的,必要时需要根据实验条件适时调整温育时间、标本浓度、显色试剂及显色时间等。
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