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目的1.通过动物实验探讨LPS干预对TLR4表达的影响。2.通过比较LPS干预后TLR4蛋白及其信号转导通路中相关细胞因子的表达,结合病理切片的结果,探讨LPS干预对军团菌感染的影响。方法1.以C3H/HeN小鼠(6-8周龄)作为实验动物,每组8只,雌雄各半。设立LPS干预染菌组、LPS未干预染菌组、.对照组三个实验组。首先对LPS干预组小鼠利用大肠杆菌脂多糖,以1mg/kg的剂量,进行腹腔注射干预,其他组腹腔注射生理盐水。24h后与LPS未干预组一起气管注射军团菌悬液染菌,对照组给予等量的生理盐水,分别于染菌后12h、24h、48h处死小鼠。2.摘除眼球取血约1ml,采用密度梯度离心分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cel, PBMC),FCMS检测各组中PBMC TLR4水平,比较三组各时间点TLR4蛋白表达水平的变化；并取左肺上叶约0.02g组织固定做病理切片。3.取左肺中叶约0.02g组织匀浆,ELISA法检测各组肺组织中TNF-a和IL-1β的含量。结果①肺组织病理切片结果显示：LPS干预染菌组、LPS未干预染菌组均出现中性粒细胞、嗜酸粒细胞、单核巨噬细胞等炎性细胞,且肺泡血管有出血现象。同时两染菌组在24h可见肺组织炎性渗出液,对照组未出现炎症反应,表明对照组未受到染菌组的污染。LPS干预染菌组肺泡血管出血较少,且炎性浸润略轻于LPS未干预染菌组。经析因分析LPS干预染菌组、LPS未干预染菌组和对照组之间肺脏脏器系数差异有统计学意义(F=5.699,P=0.006),各个时间点之间差异有统计学意义(F=10.648,P<0.001),分组和时间点之间交互作用差异无统计学意义(F=0.668,P>0.05)。经LSD法两两比较,LPS干预染菌组和LPS未干预染菌组的脏器系数均高于对照组(P<0.05),但LPS干预染菌组与LPS未干预染菌组间无统计学差异。②三组的TLR4蛋白水平表达有统计学差异(F=47.144,P<0.001),各个时间点差异有统计学意义(F=141.543,P<0.001),分组和时间点之间交互作用差异也有统计学意义(F=29.902,P<0.001)。经LSD法两两比较,LPS干预染菌组TLR4‘表达水平在12h、24h与对照组相比,差异有统计学意义,且均高于对照组(P<0.05)；LPS未干预组TLR4表达水平在12h高于对照组(P<0.05)。LPS干预染菌组与LPS未干预染菌组TLR4蛋白均在12h达到高峰,且LPS干预组TLR4水平高于LPS未干预组(P<0.05),同时两染菌组TLR4水平随着染菌时间的延长而下降,在24h、48h两染菌组TLR4表达水平差别无统计学意义。③三组间TNF-α浓度差异具有统计学意义(F=25.817,P<0.001),时间的主效应也具有统计学意义(F=8.3933,P<0.001),分组和时间点之间未发现交互作用(F=I.460,P>0.05)。经两两比较,LPS干预染菌组与对照组未发现统计学差异,但LPS未干预染菌组与对照组、LPS干预染菌组之间的TNF-α浓度差异具有统计学意义,LPS未干预染菌组各个时间点TNF-α的分泌水平均高于LPS干预染菌组,两染菌组TNF-α浓度均在感染24h时达到高峰后开始下降。三组间IL-1β浓度差异具有统计学意义(F=18.990,P<0.001),时间的主效应无统计学意义(F=I.323,P>0.05),分组和时间点之间也未发现交互作用(F=0.382,P>0.05)。LSD法两两比较后发现,LPS干预染菌组与对照组的IL-1β浓度未发现统计学差异,但LPS未干预染菌组与对照组、LPS干预染菌组之间的IL-1β浓度差异具有统计学意义,LPS未干预染菌组各个时间点IL-1β的分泌水平均高于LPS干预染菌组。结论①LPS干预可显著调高小鼠PBMC TLR4表达水平,且具有短时效应。②LPS未干预组染菌组TNF-α、IL-1β浓度均高于对照组,提示军团菌感染后机体可能通过上调了TNF-α和IL-1β的表达水平以抵抗军团菌感染。但LPS干预组染菌组TNF-α、IL-1β浓度均与对照组无明显差别,说明LPS耐受可能会减轻军团菌感染的炎性症状。