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实验目的:通过利用选择性环氧合酶-2抑制剂尼美舒利和/或组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A作用于胃癌细胞系SGC-7901后,检测其增殖和端粒酶hTERT-mRNA表达,以阐明尼美舒利和曲古抑菌素A对胃癌细胞系SGC-7901的作用机制,为NSAIDs和HDAC抑制剂应用于临床胃癌的化学预防提供理论依据。 实验方法:1.体外培养人胃癌细胞系SGC-7901后,加入不同浓度的尼美舒利(0、50、100、200、400μmol/L)和/或曲古抑菌素A(0、0.5μmol/L、1.0μmol/L、1.5μmoI/L、2.0μmol/L)进行共同培养。用相差显微镜动态地观察经尼美舒利和/或曲古抑菌素A处理后细胞的形态变化:MTT法检测人胃癌细胞系SGC-790l细胞系的增殖;RT-PCR法检测细胞端粒酶hTERT-mRNA表达。 实验结果:1.选择性环氧合酶—2 抑制剂尼美舒利或曲古抑菌素A作用于人胃癌细胞系SGC-7901后,细胞增殖受到明显的抑制,呈时间和剂量依赖性,并且端粒酶hTERT-mRNA的表达降低呈剂量依赖关系,与对照组比较差异有显著性(P<0.05).2.尼美舒利和曲古抑菌素A联用能够呈时间和剂量依赖性抑制人胃癌细胞系SGC-7901的增殖,呈剂量依赖关系降低端粒酶hTERT-mRNA的表达,与单用药物相比联用药物表现为相加或协同作用(P<0.05)。 实验结论:1.尼美舒利和曲古抑菌素A均能够抑制人胃癌细胞系的hTERT-mRNA的表达,从而抑制其生长,这表明尼美舒利和曲古抑菌素A可能是两种新的端粒酶抑制剂。2.与单用尼美舒利和曲古抑菌素A相比,联合用药更能显著地抑制人胃癌细胞系的hTERT-mRNA的表达及其增殖为临床联合用药提供了理论依据。