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中国是小麦种植大国,2019年我国小麦总产量达13359万吨,而麸皮作为小麦加工主要副产物其产量占小麦加工量五分之一左右,是一种可利用的丰富资源。小麦麸皮结构中含有多种活性基团,使其具有降血脂和降血糖,调节肠道菌群,抗龋齿及抗肿瘤等活性功能。本论文主要通过动物实验来研究小麦麸皮低聚糖对肠道菌群和机体相关免疫的影响来提高小麦麸皮的利用价值并为促进人体健康提供理论研究。本论文首先通过酶法从小麦麸皮里提取小麦麸皮戊聚糖,采用乙醇分步沉淀法进行分离纯化以得到小麦麸皮低聚糖(AXOS),通过HPLC测定了小麦麸皮低聚糖的组成并在肠道菌群体外发酵培养基进行了AXOS的体外培养实验。为了探究AXOS对肠道菌群和机体相关免疫的影响,对不同环境下的断奶应激小鼠进行了动物实验,并采用二代高通量测序方法对小鼠粪便样品中的菌群结构进行分析,主要方法和结果如下:采用酶法提取小麦麸皮戊聚糖,通过乙醇分步沉淀法进行分离纯化得到AXOS。通过HPLC测定AXOS中木糖含量4.1%,木二糖含量34.2%,木三糖含量12.7%。加酸水解后得到单糖,单糖组成主要是木糖和阿拉伯糖,木糖、阿拉伯糖和葡萄糖的比例为3.5:1:0.7。AXOS平均聚合度为2.3,阿拉伯糖的平均取代度为0.29。体外发酵结果表明,AXOS组发酵液中乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量均显著高于葡萄糖对照组。在研究AXOS对温控非无菌环境小鼠肠道菌群影响的实验中,随机将48只3周龄的雄性断奶小鼠分成A、B、C、D四组,饲养在动物房中,A组小鼠用小麦麸皮低聚糖(AXOS)进行灌胃,B组用商业低聚木糖(XOS)进行灌胃,C组用小麦麸皮低聚糖+阿魏酸(FA)(AXOS+FA)进行灌胃,阿魏酸添加量0.03%,D组(CTR)用生理盐水灌胃作为空白对照组。四组小鼠灌胃剂量0.23 g/(Kg·BW),饲喂量0.2 m L,连续饲喂21 d。灌胃结束后禁食12 h收集小鼠粪便,通过基于16s r RNA V4-V5的二代高通量方法进行测序。结果表明小鼠肠道菌群在门水平上主要为拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria),其丰度分别为45-55%,30-50%,10-30%。四个小组在上述三个群落的丰度上没有显著差异;小鼠肠道菌群在属水平上优势菌群为:粪杆菌属(Faecalibaculum)、拟杆菌属(Bacteroides)、艾克曼菌属(Akkermansia)、毛螺旋菌属(Parasutterella)、瘤梭菌属(Ruminiclostridium)、沙门氏菌属(Mucispirillum)、Anaerotruncus、Intestinimonas、乳杆菌属(Lactobacillus)、颤杆菌属(Oscillibacter)。跟空白组相比,AXOS能显著降低粪杆菌属(Faecalibaculum)的丰富度,显著提高Intestinimonas、颤杆菌属(Oscillibacter)、另枝菌属(Alistipes)、粪球菌属(Coprococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)的丰富度。在研究AXOS对无菌饲养系统小鼠肠道菌群影响的实验中,随机将48只3周龄的雄性断奶小鼠,分为A,B,C和D四组。A组用中剂量小麦麸皮低聚糖(AXOS-M)0.23 g/(kg·BW)灌胃,B组用中剂量商业低聚木糖(XOS)0.23 g/(kg·BW)进行灌胃,C组用高剂量小麦麸皮低聚糖(AXOS-H)0.70 g/(kg·BW)进行灌胃,对比组D(CTR)用生理盐水进行灌胃,所有小组小鼠灌胃量0.2 m L,连续灌胃21 d。灌胃结束禁食12h后收集小鼠粪便,解剖。通过基于16s r RNA V3-V4的二代高通量方法进行测序。结果表明,AXOS在小鼠的生长期内能促进小鼠的生长,在灌胃第7天,AXOS组小鼠日增重量显著高于空白组;两组AXOS小鼠的脾脏指数均高于空白组,肝脏指数均低于空白组,而只有高剂量AXOS能显著提高小鼠胸腺指数;两组AXOS均对小鼠粪便中短链脂肪酸产生影响,中高剂量AXOS降低小鼠粪便中乳酸含量,提高乙酸、丙酸、丁酸含量;中高剂量AXOS均能显著提高小鼠结肠组织中s Ig A含量,AXOS能保护肠道粘膜提高免疫力;对于肠道菌群结构而言,在门水平分布下,拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia)为主要群落。两组AXOS对拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)的丰度没有显著影响,而高剂量AXOS可以提高变形菌门(Proteobacteria)的丰度,两组AXOS均能降低疣微菌门(Verrucomicrobia)的丰度;各小组样品肠道菌群在属水平分布下差异特征如下:在属水平上丰度前十的物种为普氏菌属(Prevotella)、颤螺菌属(Oscillospira)、艾克曼菌属(Akkermansia)、萨特氏菌属(Sutterella)、拟杆菌属(Bacteroides)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)、Mucispirillum、螺杆菌属(Helicobacter)。两组AXOS均能显著降低艾克曼菌属(Akkermansia)和乳酸杆菌属(Lactobacillus)的丰度,显著提高萨特氏菌属(Sutterella)、螺杆菌属(Helicobacter)的丰度。试验结果表明,AXOS能提高断奶应激小鼠肠道菌群物种的丰富度和多样性;AXOS在小鼠生长期间能促进生长并对机体免疫能力产生积极影响。