【摘 要】
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本研究在37C、5%的CO、饱和湿度下采用组织块体外培养法建立人胎儿皮肤成纤维细胞系,绘制TF8、F12和F44代细胞生长曲线,并对F8、F12及F44代细胞进行核型分析,发现86.9%、84.3%和77.
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本研究在37C、5%的CO<,2>、饱和湿度下采用组织块体外培养法建立人胎儿皮肤成纤维细胞系,绘制TF8、F12和F44代细胞生长曲线,并对F8、F12及F44代细胞进行核型分析,发现86.9%、84.3%和77.8%的细胞染色体核型保持正常的倍数(2n=46)。对比了培养液不同pH值对成纤维细胞生长状况的影响(取左耳边缘第四代细胞),当pH值为6.8-7.0时,细胞贴壁率为92.20%;当pH值为7.O-7.2时,细胞贴壁率为79.3%,说明pH值对成纤维细胞生长状况的影响显著(P<0.05)。对比了第四代不同部位(背部2块、肋部2块及双耳边缘)成纤维细胞生长状况,发现不同部位成纤维细胞生长状况差异不显著(P>0.05)。
对比了不同采集方法,不同体积培养液,不同水质对牛卵母细胞经体外成熟培养后的成熟率及孤雌激活囊胚率,发现不同采集方法与不同体积培养液均无显著影响(P>0.05),两种不同水质对牛卵巢卵母细胞成熟率和卵裂率无显著影响(P>0.05),但对孤雌胚后期发育影响显著(P<0.05)。
利用人胚胎成纤维细胞作为供体,体外成熟培养18h和19h的牛卵母细胞为核移植受体,构建人-牛重构胚。发现在重构胚的融合率、卵裂率及桑椹胚的获得率上都无显著差距(P>0.05),但成熟18小时的卵母细胞较适于盲吸法。
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