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传统意义上来说,任何物质只要达到一定的暴露剂量对机体都具有毒性,而低于这一数值(即安全阈值)则不具有相应的毒性。毒理学家认为高剂量化学物质暴露可产生更为严重的危害效应,即剂量决定毒性。然而,近期关于环境内分泌干扰物(Endocrine Disrupting Chemicals, EDCs)的大量研究却对这一观念提出了质疑。外源雌激素(Xenoestrogens, XEs)作为一类典型的EDCs,其可在不同组织水平表现出双向剂量效应,尤其表现为低剂量、非线性干扰效应,而这种低剂量效应无法通过传统的高剂量效应研究进行预测和推断,并且其作用机制目前尚无定论。同时,EDCs在水环境中普遍存在,其受到越来越多研究者的关注,故EDCs存在于水环境中的综合毒性效应及作用机制仍需进一步展开研究。本课题运用经典的雌激素依赖型人类乳腺癌MCF-7,MDA-MB-231细胞及肝癌HepG2细胞开展毒性增殖实验,1)以雌激素：17-β-雌二醇(E2),17-α-乙炔基雌二醇(EE2)；雄激素：睾酮(TEST)、雄烯二酮(AND);抗雌激素药物：氟维司群(ICI 182,780)、他莫昔芬(TAM)为研究对象,对MCF-7、MDA-MB-231、 HepG2细胞进行不同浓度、不同时间的刺激,利用MTT法检测MCF-7、 MDA-MB-231、HepG2的细胞活力及癌细胞对抗癌药物的敏感性。研究结果表明：EDCs对细胞增殖效应呈现12h<24h<48h>72h的规律：EDCs对HepG2细胞的增殖效应最强；但无论雌激素、雄激素还是抗雌激素,增殖毒性并没有表现出双向剂量效应关系曲线；除TAM (10-5mol/L) 和 TEST (10-5mol/L)抑制肝癌细胞增殖外,其余暴露组均表现出促进细胞增殖效应,且增殖效应明显比乳腺癌细胞增殖效应强。2)选出细胞响应最强的时间48h作为联合作用的刺激时间,并从单独作用时选出细胞增殖效应最强和最弱的E2,TEST浓度作为底物,再与不同浓度的EE2、TAM、ICI 182,780、TEST、AND两两联合或者三者联合对细胞进行刺激,研究XEs的联合增殖毒性。结果表明：对不同组织或同一组织中不同癌变细胞,联合刺激对细胞会产生协同或拮抗效应。三类不同EDCs联合对MDA-MB-231和HepG2产生拮抗作用,而对MCF-7细胞产生协同作用。3)通过RT-PCR检测细胞内蛋白质雌激素受体α, β (ERα, ERβ) mRNA的相对含量,初步探究产生细胞毒性效应的发生机制。结果表明：不论是雌激素、抗雌激素还是雄激素,其都能上调或下调三种ER mRNA表达,故细胞增殖受三种ER mRNA的共同调节。特别地,AND和T EST作为一类典型的雄激素,也能以不同的方式刺激ER mRNA的表达。