论文部分内容阅读
目的:通过采用PCR-RFLP技术及直接测序法对汉族胃癌人群IL-17基因已知的SNP位点rs2275913,rs3748067,rs4711998和rs763780进行研究,比较各SNP位点等位基因在胃癌及正常对照人群中的分布,揭示IL-17基因的SNP位点与胃癌之间的相互关系。方法:本课题包括2013-2014年从河北省人民医院收集的386例经过内镜检查病理组织学确诊的胃癌患者及374例同期健康体检者,两组研究人群在年龄、性别构成上均相匹配。排除自身免疫及炎症性疾病,如系统性红斑狼疮、糖尿病、类风湿关节炎、炎症性肠病等,排除有胃癌家族史者,所有研究对象经血、尿、便常规和心电图检查均未发现异常。取4ml EDTA-K2抗凝血,提取基因组DNA,采用生物学软件Primer5.0设计引物,并与Gen Bank进行比对。采用PCR-RFLP方法扩增目的基因片段,进行多态性分析。统计数据在SPSS19.0软件包中完成,各统计指标均以均数±标准差(mean±SD)表示。用基因计数法计算各基因型频率和等位基因频率;胃癌组与对照组间基因型频率和等位基因频率的差异用X2检验;并通过多元线性回归分析IL-17基因多态性与胃癌的关系。P<0.05为有统计学意义。结果:1病例组从性别、年龄、吸烟史方面和对照组比较均无统计学差异(P>0.05),而饮酒方面明显高于对照组,有显著的统计学差异(P<0.05)。2病例组中的血清学指标TNF-α、IL-6、Hs-CRP、IL-17、CEA浓度均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3 IL-17 rs2275913位点多态性显示,GG,GA,AA三种基因型在病例组中的基因频率分别是0.5181,0.3316和0.1503,A等位基因的频率是0.3161,而这三种基因型在对照组中的基因频率分别是0.5428,0.3289,0.1283,A等位基因的频率是0.2928,病例组与对照组相比较,GA,AA基因型频率无统计学差异(X2=0.116,P>0.0;X2=0.870,P>0.05),A等位基因频率也无统计学差异(X2=0.814,P>0.05)。4 IL-17 rs3748067位点多态性显示,病例组中CC、CT和TT三种基因型的频率分别是0.7979,0.1347和0.0674,T等位基因的频率是0.1347,而对照组中三种基因型频率分别是0.8636,0.1203,0.0161,T等位基因的频率是0.0762,病例组中TT基因型和T等位基因频率显著高于正常对照组,差异具有统计学意义。(X2=12.82,P<0.05;X2=12.805,P<0.05)。5 IL-17 rs4711998位点多态性显示,在病例组中三种基因型GG,GA,AA的基因频率分别是0.3316,0.4456和0.2228,A等位基因的频率是0.4456,而这三种基因型在对照组中的基因频率分别是0.3610,0.4652,0.1738,A等位基因的频率是0.4064,病例组与对照组比较,GA,AA基因型频率无统计学差异(X2=0.065,P>0.05;X2=2.636,P>0.05),A等位基因频率也无统计学差异(X2=1.462,P>0.05)。6 IL-17 rs763780位点多态性显示,在病例组中三种基因型AA,AG,GG的基因频率分别是0.7616,0.1503和0.0881,G等位基因的频率是0.1632,而这三种基因型在对照组中的基因频率分别是0.8342,0.1444,0.0214,G等位基因的频率是0.0936,病例组中GG基因型和G等位基因显著高于正常对照组,两者相比有显著的统计学差异(X2=16.534,P<0.05;X2=16.399,P<0.05)。7多元线性回归显示①以胃癌为因变量,以IL-17 rs2275913位点基因型(GG=0,GA=1,AA=2)、TNF-α、IL-6、Hs-CRP、IL-17、CEA、BMI为自变量,进行多元线性回归分析,自变量未进入回归方程P>0.05。②以胃癌为因变量,以IL-17rs3748067位点基因型(CC=0,CT=1,TT=2)、TNF-α、IL-6、Hs-CRP、IL-17、CEA、BMI为自变量,进行多元线性回归分析,最后基因型进入方程。回归方程为:y=0.531(基因型)+0.895,P<0.05。③以胃癌为因变量,以IL-17rs4711998位点基因型(GG=0,GA=1,AA=2)、TNF-α、IL-6、Hs-CRP、IL-17、CEA、BMI为自变量,进行多元线性回归分析,自变量未进入回归方程P>0.05。④以胃癌为因变量,以IL-17rs763780位点基因型(AA=0,AG=1,GG=2)、TNF-α、IL-6、Hs-CRP、IL-17、CEA、BMI为自变量,进行多元线性回归分析,最后基因型和IL-6进入方程。回归方程为:y=1.102(基因型)+0.635(IL-6)+3.135,P<0.05。结论:1 IL-17 rs2275913位点和rs4711998位点的基因多态性分布在病例组和对照组均没有差异,提示其多态性可能与胃癌的发病风险无关联。2 IL-17 rs3748067位点的基因多态性分布在病例组与对照组中有统计学意义,该位点基因多态性与胃癌密切相关且TT基因型显著增加了胃癌的发病风险。3病例组中IL-17 rs763780位点基因多态性与对照组相比有显著的统计学意义,GG基因型显著增加了胃癌的发病风险。