【摘 要】
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目的:本项研究旨在观察热联合脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)打击对人单核细胞细胞活性、炎性分泌和趋化能力的影响,以及利用髓样细胞触发受体-1(Triggering Receptor Expressed on Myeloid cell-1,TREM-1)抑制剂LP17调控单核细胞TREM-1表达后对上述活性功能变化的影响。方法:以人单核细胞株(THP-1)为实验对象,通过热联合
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目的:本项研究旨在观察热联合脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)打击对人单核细胞细胞活性、炎性分泌和趋化能力的影响,以及利用髓样细胞触发受体-1(Triggering Receptor Expressed on Myeloid cell-1,TREM-1)抑制剂LP17调控单核细胞TREM-1表达后对上述活性功能变化的影响。方法:以人单核细胞株(THP-1)为实验对象,通过热联合LPS打击THP-1建立模拟重症中暑细胞模型,分为4组:37℃组、43℃+LPS组、43℃+LPS+LP71组、43℃+LPS+LP17组。使用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative Real-time polymerase chain reaction,q PCR)法检测TREM-1核酸表达、免疫蛋白印迹(Western Blot,WB)法检测TREM-1和核因子(Nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白表达;酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)法检测细胞培养上清液中白介素-6(Imerleukin-6,IL-6),白介素-1β(Imerleukin-1β,IL-1β),肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子浓度;细胞迁移试验法检测各组单核细胞趋化能力。结果:热联合LPS打击后THP-1的TREM-1 m RNA(p<0.01)明显升高,蛋白表达明显升高(p<0.01),细胞培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6浓度显著增加(p<0.01),同时THP-1的趋化能力升高、NF-κB通路相关蛋白p65磷酸化增多。结论:抑制TREM-1表达可以改善热联合LPS打击后THP-1的炎症分泌活性和趋化能力的过度增强,这种作用的内在机制与下调NF-κB通路p65蛋白磷酸化有关。
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