我国主栽银耳配对香灰菌β-tubulin序列的遗传鉴定及生物学特性研究

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银耳(Tremella fuciformis Berk.)又名白木耳、雪耳,是一种珍贵的食药两用真菌。中医认为,银耳性平,味甘,无毒,具有“补肾、润肺、生津、止咳”的功效。现代医学研究证实,银耳具有提高人体免疫力,保肝解毒,抗肿瘤,延缓衰老等功效。随着人们生活水平的提高和保健意识的增强,银耳的消费市场潜力巨大。与大多数生产栽培的食用菌不同,银耳生活史的完成必须要有伴生菌香灰菌的协同作用。已有研究表明,银耳菌分解纤维素和木质素的能力较弱,在人工银耳栽培出菇的过程中,香灰菌分解培养料,为银耳生长提供营养,因此,香灰菌的活力与银耳产量直接相关。但目前对于香灰菌的认识十分欠缺,对香灰菌分类地位存在争议,对香灰菌生物学特性也少有报道,这为后继银耳与香灰菌的作用机理分析、银耳及香灰菌新品种选育等研究带来巨大障碍。本文对5株我国不同地区生产中主栽银耳的配对香灰菌进行了β-tubulin序列的遗传鉴定,并对供试菌株的碳源、氮源利用能力,温度,pH适应性等进行了研究:以期为香灰菌与银耳的相互作用机理研究提供信息、为银耳及香灰菌品种选育等奠定基础。本论文的主要研究结果如下:1.对来自我国不同银耳产地的5株香灰菌菌株进行了(3-tubulin序列分析,PCR扩增产物进行序列测定,所测得序列利用MEGA4.0软件进行ClustalW序列的对齐,结果显示,5株供试菌株β-tubulin序列具有很高的同源性,在β-tubulin水平上5株供试香灰菌菌株可视为同一个种。通过与Genbank中序列比对,将本研究中的5株供试菌株鉴定为Annulohypoxylon stygium。2.供试菌株对碳源利用能力的分析结果显示,供试的9种碳源中,香灰菌能广泛利用各类碳源,可较好地利用果糖、葡萄糖、甘露醇等单糖,蔗糖、乳糖等双糖以及纤维素钠等,其中以果糖利用最好,木糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇次之,乳糖最差。3.供试菌株对氮源利用能力的分析结果显示,供试11种氮源中,香灰菌对铵态氮(氯化铵、硫酸铵、磷酸铵)、硝态氮(硝酸钠)以及有机态氮(甘氨酸、半胱氨酸)均能利用,其中对氯化铵和硫酸铵效果最好,硝酸铵、半胱氨酸次之,磷酸铵最差。4.温度实验结果表明,在PDA培养基上,5个菌株在10-40℃的范围内都能生长;30℃为最适温度。在温度低于10℃或高于40℃时,5个菌株均不能生长。5.供试菌株对pH的适应性实验结果显示,5个菌株在pH4.01~10.20的范围内均能生长;在pH5.00~9.03时菌丝生长较快且生长势较好;pH大于9.03时生长速度迅速下降。试验结果同时显示,菌株在中性偏酸的环境中生长最好。
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