【摘 要】
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从U细胞总RNA中,扩增mCD的cDNA片段,转梁COS-7细胞,测定表达水平为16.1﹪.扩增人sCD片段,转染COS-7与CHO细胞,测定表达水平为13.1﹪.通过免疫亲和层极纯化,纯度高于90﹪.纯化产物的
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从U<,937>细胞总RNA中,扩增mCD<,14356aa>的cDNA片段,转梁COS-7细胞,测定表达水平为16.1﹪.扩增人sCD<,14356aa>片段,转染COS-7与CHO细胞,测定表达水平为13.1﹪.通过免疫亲和层极纯化,纯度高于90﹪.纯化产物的蛋白测定表明,sCD<,14356aa>的表达量约为10.44ug/ml.通过两次PCR点突变技术,对sCD<,14356aa>蛋白N端第8-13位氨基酸,进行丙氨酸替代突变.转染COS-7与CHO细胞,Westernblot证实为目的蛋白.实验观察了sCD<,14356aa>对LPS诱导U<,937>细胞产物TNF-a,以及表达CD<,14>的影响,一定程度上说明表达的重组sCD<,14356aa>具有天然蛋白的生物学活性.该研究在真核系统中表达了mCD<,14356aa>、sCD<,14356aa>、sCD<,14(8-13)A152aa>,对sCD<,14356aa>进行了初步生物学研究,为进一步研究CD<,14>奠定了基础.
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