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目的：检测三氧化二砷(As2O3)对人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌HeLa细胞和胰腺癌AsPC-1细胞(HPV阴性)的凋亡诱导作用和它对细胞内H2O2水平的影响，探讨As2O3诱导HeLa细胞凋亡的分子机制；验证HPV感染与As2O3诱导肿瘤细胞凋亡的关系；用As2O3和维生素C诱导HeLa细胞凋亡，探讨维生素C是否能增强As2O3诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡，以及它对细胞内H2O2水平的影响；探讨单独维生素C是否能诱导实体肿瘤宫颈癌HeLa细胞凋亡，及其相关作用机制，为临床治疗宫颈癌提供新思路。
方法：采用不同浓度的As2O3处理HeLa细胞和AsPC-1细胞不同时段，用MTT法、光学显微镜观察、电镜、流式细胞仪等方法检测As2O3对HeLa细胞和AsPC-1细胞生长抑制作用和诱导细胞凋亡作用；用不同浓度的As2O3处理细胞2h、5h、8h、12h、24h后，用DCFH-DA标记检测细胞内的H2O2水平。采用维生素C和As2O3联合或不同浓度的维生素C单独处理HeLa细胞不同时段观察凋亡情况，测定细胞内的过氧化氢(H2O2)水平的变化情况变化。
结果：2μmol/LAs2O3处理HeLa细胞48h后细胞的生长受到明显抑制，表现出细胞凋亡的特征，随着As2O3浓度的增加和作用时间的延长效果更加明显。而1μmol/LAs2O3处理AsPC-1细胞24h即呈现明显的生长抑制和凋亡特征。As2O3处理HeLa细胞后细胞内H2O2的水平比对照组明显升高，持续一段时间后又下降，并呈现明显的剂量依赖性。As2O3同样影响AsPC-1细胞内H2O2的水平。维生素C和As2O3联合处理HeLa细胞较单一As2I3处理HeLa细胞的凋亡率增加，且出现凋亡的时间提早。联合用药48h后检测细胞内H2O2的水平，发现细胞内H2O2的水平比对照组低。较高浓度维生素C(0.5mmol/L)单独处理HeLa细胞24h后细胞的生长也受到抑制，表现出细胞凋亡的特征，且MTT检测和流式细胞分析的结果显示有剂量和时间依赖性。检测细胞内H2O2水平，发现维生素C也能提高HeLa细胞内H2O2水平，且呈现明显的剂量依赖性。
结论：1、As2O3可抑制HPV阳性的人宫颈癌HeLa细胞和HPV阴性的人胰腺癌AsPC-1细胞增殖，诱导其凋亡，这与上调细胞内H2O2水平有关。2、H2O2积累是As2O3诱导细胞凋亡途径中的早期事件。3、As2O3诱导肿瘤细胞凋亡在不同细胞系机制可能不一样，As2O3下调HeLa细胞HPV致瘤蛋白表达可能是As2O3诱导细胞凋亡的下游事件。4、小剂量维生素C能增强As2O3诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡。5、较高浓度(0.5mmol/L)的维生素C能独立诱导HeLa细胞凋亡，也是通过细胞内的H2O2积累来实现的，维生素C可能成为临床治疗宫颈癌的一种选择。