钛离子对Jurkat T淋巴细胞KCa3.1通道的影响

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目的:观察钛离子作用于Jurkat T淋巴细胞后KCa3.1通道表达情况及阻断KCa3.1通道前后细胞膜电位、胞内钙离子变化,探讨KCa3.1通道在钛离子对JurkatT淋巴细胞活化中可能存在的作用机制。  方法:1、体外培养Jurkat T淋巴细胞,采用植物凝血素(PHA)预活化,CCK8法检测不同浓度钛离子对活化Jurkat T淋巴细胞的增殖影响。  2、根据是否被植物凝血素(PHA)预活化,将Jurkat T淋巴细胞分为PHA(+)及PHA(-)两大组,两组分别加入浓度为0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L钛离子,作用12h后,实时荧光定量多聚酶链反应技术(Real-time PCR)检测KCa3.1通道的表达量。流式细胞术检测TRAM-34阻断前后Jurkat T淋巴细胞膜电位及细胞内钙离子浓度的变化。  结果:1、钛离子对预活化Jurkat T淋巴细胞随着钛离子的浓度的增加增殖更加明显(P<0.05)。  2、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度的钛离子在PHA(-)Jurkat T淋巴细胞作用的下培养12小时,随着钛离子浓度的增加KCa3.1mRANA相对于对照组表达增加,差异没有统计学意义(P>0.05)。25μmol/L,50μmol/L,100μmol/L浓度的钛离子在PHA(+)Jurkat T淋巴细胞作用的下培养12小时,随着钛离子浓度的增加KCa3.1mRANA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。  3.KCa3.1通道被TRAM-34阻断后,50μmol/L钛离子(PHA-)Jurkat T淋巴细胞组的膜电位与不加钛离子组比较差异无统计学意义(P>0.05),TRAM-34(+)与TRAM-34(-)组间比较差异有统计学意义(P<0.05);50μmol/L钛离子(PHA+)Jurkat T淋巴细胞组的膜电位与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),TRAM-34(+)与TRAM-34(-)组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。50μmol/L钛离子(PHA-)Jurka T淋巴细胞组的钙离子浓度与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),TRAM-34(+)与TRAM-34(-)组间比较差异无统计学意义(P>0.05);50μmol/L钛离子组(PHA+)JurkatT淋巴细胞组的钙离子浓度与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),TRAM-34(+)与TRAM-34(-)组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。  结论:1.100μmol/L以内的钛离子能增加活化Jurkat T淋巴细胞的增殖效应。  2.钛离子可引起活化Jurkat T淋巴细胞KCa3.1通道表达的改变。  3.KCa3.1通道可在一定程度上调节钛离子对活化Jurkat T细胞内钙离子浓度及膜电位。
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