辣椒疫霉菌钙离子通道Mid1和Coh1的功能分析

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辣椒疫霉菌(Phytophthoracapsici Leonian),属茸鞭生物界(Stramenopilia)卵菌门(Oomycota)疫霉属(Phytophthora),寄主范围很广,能引起22个科500多种作物病害,每年在生产上也造成重大经济损失。已有研究表明,在模式生物酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae),粗糙脉孢菌(Neursporacrassαα)中钙离子通道蛋白Mid1和Cch1在细胞的形态建成、营养生长、细胞壁合成以及致病性方面有着重要的作用,但是,在辣椒疫霉菌中Mid1和Cch1的功能还不清楚。为了分析辣椒疫霉菌钙离子通道蛋白在生长发育和致病过程中的功能,我们采用基因沉默的方法,将Mid1和Cch1编码框序列正向和反向插入的转化单元转化辣椒疫霉菌(LT1534),利用辣椒疫霉稳定转化系统,获得了该基因的沉默突变体。研究结果表明,Mid1和Cch1沉默转化子的生长速率与野生型相比,均下降了约60%;沉默Mid1和Cch1后严重影响了游动孢子的产生,并且在菌丝和孢子囊形态等方面与野生型菌株有着显著差异。接种结果表明Mid1和Cch1沉默突变体降低了对辣椒和烟草叶片的致病性。Mid1和Cch1沉默突变体在菌丝生长,孢子囊形态等方面的表型十分相似,然而在游动孢子的产生以及对辣椒和烟草叶片的致病性方面,Mid1沉默突变体表现出更少的游动孢子产生和更弱的致病能力。部分回补发现钙离子能回补辣椒疫霉菌Mid1和Cch1突变体的生长表型,进一步的功能回补明确了辣椒疫霉菌Mid1和Cch1能回补酵母突变体的功能。除此之外,Mid1和Cch1可能参与外源H202胁迫的应答。以上结果说明辣椒疫霉菌钙离子通道蛋白Mid1和Cch1调控辣椒疫霉菌的生长发育和致病性。
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