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目的:了解DNMT3A基因在急性髓系白血病(AML)患者中的突变比例和类型,分析DNMT3A基因突变患者的临床特征和突变在AML种的预后价值,分析该突变在疾病进展中的变化情况。
方法:抽取101例髓系白血病患者的骨髓或外周血,提取RNA逆转录成cDNA,并设计两对引物用于扩增DNMT3A基因,电泳验证产物条带后进行直接测序。提取所有患者的全基因组DNA进行毛细管电泳,检测NPMI和FLT3-ITD两种基因的突变情况。同时检测其它相关危险因素,如外周血白细胞数、免疫表型、染色体核型,并进行统计学分析。
结果:共检测出14例(13.9％)突变患者,其中M57例(50％),M13例(21.4％),M31例(7.1％),嗜酸细胞白血病1例(7.1％)。突变形式多为错义突变,也有无义突变及缺失突变,热点突变累积第882位精氨酸,在两例患者中还发现了双突变现象。33例正常核型(Cytogenetically Normal,CN)患者中,发生DNMT3A基因突变10例(30.3％)。发生该基因突变的患者还可伴随CD4、CD7等淋巴系抗原的表达。DNMT3A基因突变与M5亚型、年龄及NPM1基因突变相关,但与外周血白细胞数、性别、CD7表达无关,且对首次CR率没有影响。在1例CEL患者经格列卫治疗后突变没有消失,另外1例M5患者经6程(3+7)方案化疗后突变消失。
结论:(1)对于中国白血病患者,DNMT3A基因突变检出率为13.9％,推测其存在人种差异。(2)DNMT3A基因突变在M5中占33.3％,与患者的年龄及NPMI突变相关,与性别、早期死亡、初诊白细胞数、免疫表型、染色体核型、FLT3-ITD突变及疗效无关,为一独立的预后因素。(3)M3型白血病中DNMT3A基因突变少见。(4)化疗可能使基因突变消失,突变能否作为微小残留病(Minimal residualdisease,MRD)检测尚待进一步讨论。