移植级壳聚糖中生物质杂质的检测和去除

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chyfandy
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以壳聚糖为壁材制备的微胶囊用于体内移植得到了越来越广泛的研究,然而移植材料的纯度直接影响了体内移植效果。壳聚糖是天然高分子材料,随着其来源不同、制备批次不同、生产厂家不同,壳聚糖中杂蛋白质、细菌内毒素等杂质含量及其他性质都有较大的差别。因此对壳聚糖中的杂质含量进行检测和控制,保证其后续产品特性和产品安全可重复性是临床应用的必然要求。本文旨在建立快速有效的检测壳聚糖中的杂蛋白质及细菌内毒素含量的实验方法,考察不同的纯化工艺对于这些杂质的去除效果,为制定移植级的壳聚糖的质量标准提供参考。首先本文建立了以考马斯亮蓝法对壳聚糖中杂蛋白质的相对含量进行检测、以及动态浊度法对壳聚糖中的细菌内毒素含量进行了检测的实验方法。并通过上述方法对壳聚糖中的杂蛋白质、细菌内毒素等杂质的含量进行了测定,实验证明,以上方法可快速可靠的检测壳聚糖中的这两种杂质含量。其次本文尝试了过滤醇洗、活性炭吸附、HCl处理、NaOH处理、Sevag法、表面活性剂处理等多种方法对壳聚糖中的杂蛋白质进行去除,实验结果表明:过滤醇洗法、活性炭吸附法、Sevag法对壳聚糖中杂质蛋白质的去除率低于10%,NaOH处理、表面活性剂SDS法对壳聚糖中杂质蛋白质的去除率在15~20%之间,而表面活性剂吐温20法对蛋白质的去除率最高,当体系pH=3.00,吐温20与壳聚糖的投料量比为5:2时,对壳聚糖中杂质蛋白质的去除率可达73%。另外对比了过滤、活性炭吸附、NaOH法、表面活性剂等方法对壳聚糖中的细菌内毒素的去除效果,实验结果表明:过滤、活性炭吸附、表面活性剂等工艺都对壳聚糖中的细菌内毒素有一定的去除效果;NaOH法可使壳聚糖溶液中的细菌内毒素含量降为3118EU/g,去除率达94%。改进并结合实用方法,活性炭吸附法与表面活性剂法结合、NaOH法与表面活性剂法结合去除壳聚糖中细菌内毒素,都可使其含量降到625EU/g以下。
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