马铃薯黑痣病是由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的一种土传真菌病害,对马铃薯的产量和质量都造成了严重的影响,很大程度制约了我国马铃薯产业的发展。为减轻马铃薯黑痣病的发生,为其生物防治提供依据,本研究以甘肃省马铃薯黑痣病的高发地分离、纯化出的立枯丝核菌为病原菌,研究生防球毛壳菌ND35菌株、棘孢木霉MX菌株、产紫青霉菌Q2菌株及其组合对马铃薯黑痣病的防治效果及其防病机理。研究内容主要包括病原菌的分离与鉴定,生防菌的拮抗及促生因子检测、生防菌株间的相容性检测,生防菌株对病原菌拮抗作用,温室盆栽试验和田间防病试验,生防菌株及其组合对盆栽马铃薯植株防御酶活性、丙二醛、叶绿素含量以及根系活力的影响。试验结果如下:1、对分离纯化得到的病原菌进行形态特征和致病性测定结果显示,将此菌株确定为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)HZ1菌株。2、生防球毛壳菌ND35菌株、棘孢木霉MX菌株、产紫青霉菌Q2菌株对马铃薯黑痣病的病原菌立枯丝核菌HZ1菌株拮抗测定结果显示,各生防菌株对病原菌菌丝都有明显的抑制作用。其中,平板拮抗抑制率分别为66.46%、84.25%、57.83%;生防菌株发酵滤液对病原菌抑菌率分别为41.62%、9.76%、76.07%;各生防菌株间的拮抗结果显示,菌丝间均没有抑菌带的产生。3、生防菌株的拮抗及促生因子检测结果显示,球毛壳菌ND35菌株可产生纤维素酶、葡聚糖酶和生长素;棘孢木霉MX可产生纤维素酶、生长素,具有解磷能力;产紫青霉菌Q2可产生纤维素酶、蛋白酶、葡聚糖酶和生长素,具有解磷能力。同时镜检三株生防菌与HZ1菌株交界处的菌丝,发现各生防菌株均具缠绕、侵入、寄生等重寄生作用,同时生防菌株的代谢产物会造成病原菌菌丝的断裂、畸形、溶解。4、对盆栽马铃薯幼苗生理指标的检测发现,各处理中的菌株Q2和生防菌组合A对马铃薯植株的株高、茎粗、鲜重、干重等,均具有明显促生长作用,菌株MX对马铃薯植株茎粗有明显促生作用,生防菌组合C对马铃薯植株茎粗和干重具有显著促生作用。其他生防菌株及其组合等处理,对马铃薯植株的生长基本没有影响。盆栽防病试验中发现,各生防菌株及其组合等处理均显著降低了马铃薯黑痣病的发病率和病情指数,其中降低黑痣病发病率最为明显的是球毛壳菌ND35和生防菌组合A,分别降低了12.7%和14.28%,防治效果最好的处理为产紫青霉菌Q2、生防菌组合A、组合C,防治效果分别为42.79%、43.9%、41.74%。5、大田防病试验发现,各生防菌株及其组合处理均显著降低了马铃薯黑痣病的发病率和病情指数,其中降低黑痣病发病率最为明显的是产紫青霉Q2和生防菌组合C,分别降低了28.33%和23.33%,防治效果最好的处理为产紫青霉菌Q2,生防菌组合A、组合C,其防效分别为41.16%、37.52%、37.57%。6、对植株防御酶活性、根系活力检测、叶绿素含量检测结果表明,不同生防菌及其组合处理检测值要显著高于未加任何生防菌株的空白对照(CK)处理组。其中第30 d时,产紫青霉Q2的过氧化物酶(POD)活性最高,达到了5814.67 U/g,是对照(CK)处理组的3倍以上;球毛壳菌ND35的超氧化物歧化酶(SOD)的酶活性最高,达到了746.85 U/g,是对照处理组的3倍以上;生防菌组合A的过氧化氢酶(CAT)活性最高,达到了186.66 U/g,是对照处理组的6倍以上:球毛壳菌ND35根系活力最高,达到了69.23 mg/(g*h),活力比对照处理组提高91.67%;生防菌组合A的叶绿素含量最高,达到了2.69 mg/g,比对照处理组提高了29.84%。对植株丙二醛(MDA)含量检测结果表明,不同生防菌及其组合等处理的MDA积累量在检测周期内均没有显著的提升,而对照(CK)处理组的MDA含量却随时间的延长,积累越来越多,第30 d时,含量达到了48.47 nmol/g鲜重。综上所述,生防球毛壳菌ND35菌株、棘孢木霉MX菌株、产紫青霉菌Q2菌株及其组合A、B、C均对马铃薯黑痣病有不同程度的防治效果,并可提高植株系统抗性。生防菌株ND35、MX、Q2及其组合对黑痣病防治效果及其作用机理的研究为马铃薯黑痣病的优良生防菌剂以及拮抗菌生物制剂的研制和开发奠定了基础。