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目的：观察高剂量咖啡因、可可碱对大鼠焦虑行为的影响,探讨神经肽Y系统在其中具体的作用机制。方法：成年雄性Wistar大鼠30只,体重280±20g。随机数字表法将大鼠分为5组,每组6只。5组分别为生理盐水对照组、咖啡因30mg/kg组、咖啡因60mg/kg组、可可碱30mg/kg组、可可碱60mg/kg组,给药方式均为灌胃给药。给药后30min进行高架十字迷宫测试大鼠焦虑行为,分别观察各组药物对大鼠焦虑行为的影响；用荧光定量PCR技术检验大鼠海马神经肽Y、Y1受体、Y2受体mRNA的表达水平,并通过与对照组比较,判断神经肽Y系统在高剂量咖啡因、可可碱对大鼠焦虑行为的影响。结果：1.大鼠运动活性结果：摄入60mg/kg咖啡因可使动物的运动活性明显下降（F=21.774,P=0.001）,而30mg/kg可可碱则可明显升高（F=6.869,P=0.026）。摄入60mg/kg咖啡因较30mg/kg咖啡因的动物运动活性明显下降（F=15.168,P=0.003）,而60mg/kg可可碱较30mg/kg可可碱也明显下降（F=12.331,P=0.006）。摄入30mg/kg咖啡因（F=1.244,P=0.291）与60mg/kg可可碱（F=1.553,P=0.241）对动物运动活性无显著影响,且两组药物对动物运动活性影响相当（F=0.023,P=0.882）2.大鼠焦虑行为结果：摄入60mg/kg咖啡因可使动物开臂次数%（F=5.336,P=0.044）及开臂时间%（F=7.750,P=0.019）明显均下降。摄入60mg/kg可可碱可使动物开臂次数%（F=5.022,P=0.049）明显下降。60mg/kg咖啡因组较30mg/kg咖啡因组开臂次数%明显减少（F=7.569, P=0.020）。60mg/kg可可碱组较30mg/kg可可碱组无论是开臂次数%（F=24.587,P=0.001）及开臂时间%（F=17.065,P=0.002）均显著减少。3.与空白对照组相比（NPY/GAPDH值）,摄入60mg/kg咖啡因动物NPY明显升高（F=13.961, P=0.004）,30mg/kg可可碱NPY明显降低（F=7.597,P=0.020）。摄入60mg/kg咖啡因动物NPY明显较30mg/kg咖啡因高CA30（F=7.169,P=0.023）。摄入30mg/kg咖啡因（F=32.963,P=0.000）及30mg/kg可可碱动物（F=10.541,P=0.009）Y1 mRNA明显升高。摄入60mg/kg可可碱动物Y1 mRNA较空白组有增高趋势（F=4.227,P=0.067）。摄入30mg/kg可可碱动物Y2 mRNA较空白组增高（F=4.532,P=0.050）。结论：本论文阐述了高剂量咖啡因及可可碱对大鼠焦虑行为的影响,并从分子生物学的层面解释了其具体的分子机制。过往研究中发现高剂量咖啡因具有致焦虑作用,但其具体作用机制尚未完全揭示；而高剂量可可碱对焦虑的具体作用仍未见报道。本研究首先采用了动物焦虑研究广泛应用的高架十字迷宫（EPM）模型,进行了动物行为学的研究,并详细阐述了两种物质分别对大鼠焦虑行为的具体作用。其后,采用目前较先进的荧光定量PCR技术精确检测海马区NPY、Y1、Y2mRNA表达水平,并发现咖啡因、可可碱在不同焦虑行为影响作用下分子生物学层面的差异,首次阐述了咖啡因、可可碱对NPY系统的具体作用。本研究发现：高剂量咖啡因致大鼠焦虑,且具有量效关系；并可能导致动物运动活性降低。分子生物学层面发现,其可导致NPY及Y1mRNA表达明显升高,且具有量效关系；对Y2mRNA没有影响。高剂量可可碱可产生抗焦虑作用,且可能导致动物运动活性增高；但过高剂量则产生致焦虑作用。分子生物学层面发现,高剂量可可碱可导致NPY mRNA表达明显降低,且通过上调Y2 mRNA水平达到该作用；过高剂量可可碱则导致NPY及Y1mRNA表达明显升高,对Y2mRNA没有影响。综上所述,咖啡因、可可碱是人们生活中常食用的物质,其对焦虑的作用及其具体机制的研究具有重大的意义,然而目前该领域的研究仍有待深入。本研究对高剂量咖啡因、可可碱影响机体焦虑的作用有了更深刻的认识,并探讨了其具体的作用机制。结果有望对咖啡因、可可碱的食用习惯、NPY靶点抗焦虑药物的开发等起到一定的指导作用。