【摘 要】
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目的:肺腺癌5种亚型中,附壁样为主型肺腺癌亚肺叶切除已经足够,而包含有微乳头状和/或实体型成分的肺腺癌需行肺叶切除术。而术中冰冻病理检查对微乳头状和实体型成分诊断的准确性具有挑战性,故需要寻找一种简便、快捷、准确的诊断工具,对肺腺癌亚型进行分型,为肺腺癌的手术方式提供指导,以实现个体化的精准治疗。方法:1.利用抗体芯片技术检测不同肺腺癌亚型之间的差异性蛋白表达,筛选出与微乳头状和实体型肺腺癌相关的
【基金项目】
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吴阶平医学基金会卓越外科基金项目；
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目的:肺腺癌5种亚型中,附壁样为主型肺腺癌亚肺叶切除已经足够,而包含有微乳头状和/或实体型成分的肺腺癌需行肺叶切除术。而术中冰冻病理检查对微乳头状和实体型成分诊断的准确性具有挑战性,故需要寻找一种简便、快捷、准确的诊断工具,对肺腺癌亚型进行分型,为肺腺癌的手术方式提供指导,以实现个体化的精准治疗。方法:1.利用抗体芯片技术检测不同肺腺癌亚型之间的差异性蛋白表达,筛选出与微乳头状和实体型肺腺癌相关的特异性蛋白或其组合;2.利用Western Bolt法和免疫组化法检测上一步骤中筛选出来的胰岛素样生长因子结合蛋白2（Insulin-like growth factor-binding proteins,IGFBP2）和P-钙黏蛋白（P-cadherin）在两组肿瘤中的表达情况;3.结合半干斑点印迹技术建立检测这两种亚型成分的诊断工具,用于检测术中浸润性肺腺癌肿瘤标本中的微乳头状和实体型成分;4.对照术后常规石蜡切片病理结果和半干斑点印迹技术检测的结果,评估该方法的准确性。结果:1.通过抗体芯片技术,对凋亡阵列的43个目标蛋白和粘附阵列的17个目标蛋白进行检测,筛选出2个差异蛋白。结果显示,与附壁样为主型肺腺癌组（对照组）相比,凋亡阵列中IGFBP2在微乳头状/实体型为主型肺腺癌组（实验组）中具有高表达,差异具有统计学意义（P＜0.01）;粘附阵列中P-cadherin在实验组中具有高表达,差异具有统计学意义（P＜0.05）。2.Western Bolt法和免疫组化法验证15组实验组与对照组肺腺癌中IGFBP2和P-cadherin的表达情况,Western Bolt法结果显示,IGFBP2和P-cadherin在实验组肿瘤组织中表达均有明显增强,差异具有统计学意义（P＜0.01）;免疫组化法结果显示,IGFBP2和P-cadherin在实验组的阳性表达率（86.67%和80.00%）,明显高于对照组（20.00%和26.67%）,差异均具有统计学意义（P＜0.01）。3.利用半干斑点印迹技术结合筛选出来的IGFBP2和P-cadherin,检测60例浸润性肺腺癌术中肿瘤标本,准确率为80.0%（95%CI,69.6%-90.4%）。经术后最终病理检查结果证实含有微乳头状/实体型成分的病例一共27例,半干斑点印迹技术成功检测出其中的19例（敏感性70.4%,95%CI:52.0%-88.8%）;经病理检测结果证实不含有微乳头状/实体型成分的病例一共有33例,经半干斑点印迹技术检测出其中的29例（特异性87.9%,95%CI:76.1%-99.6%）;阳性预测值和阴性预测值分别为82.6%（95%CI:65.8%-99.4%）和78.4%（95%CI:64.5%-92.3%）。结论:1.本研究中,采用抗体芯片技术筛选出的差异蛋白IGFBP2和P-cadherin在微乳头状/实体型为主型肺腺癌中高表达,可以作为一抗用于半干斑点印迹技术;2.本研究中,采用半干斑点印迹技术检测肺腺癌中的IGFBP2和P-cadherin,可能在识别微乳头状和/或实体型成分上具有一定的优势。
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