近年来,畜牧业迅速发展,养猪业趋向规模化、集约化、高效化养殖。猪人工授精技术受到养殖场的重视,在生产实际中应用越来越多。猪精液随着体外保存时间的延长,质量会明显下降。这些不良反应的主要原因之一就是活性氧(ROS)水平和抗氧化系统之间的平衡失调。事实上,精子中适量浓度的ROS对精子是有利的,其可引起精子发生顶体反应、超活化和获能等。但是,ROS一旦过量就会直接损伤细胞器,膜和精子DNA,导致精子凋亡和死亡。许多研究表明,添加抗氧化剂可以有效防御氧化应激对精子造成的损伤。本研究通过向经典猪精液常温保存稀释液BTS中添加不同浓度的虾青素——一种天然抗氧化剂,检测精液保存不同时间点精子活力、质膜完整率、顶体完整率、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、精子运动参数、活性氧(ROS)、精液ATP水平、精子线粒体膜电位以及精液中主要的抗氧化酶和能量代谢相关的酶等,以期为虾青素作为强抗氧化剂应用在猪精液常温保存稀释液中提供理论依据。本研究主要获得以下结果:1.经典猪精液常温保存稀释液BTS中添加不同浓度(0.10、0.20、0.25、0.30、0.40、0.60、0.80、1.00μg/mL)虾青素,对猪精子常温保存具有积极作用。其中,BTS中添加0.25μg/mL虾青素的储存效果最佳,17℃保存第5 d的猪精子活力、头部质膜完整率、尾部质膜完整率和顶体完整率分别为:65.33%、73.45%、77.50%和73.45%,显著高于对照组(P<0.05);但是添加虾青素浓度范围为0.60~1.00μg/mL组精子活力显著低于对照组(P<0.05)。2.稀释液BTS中添加不同浓度(0.10、0.20、0.25、0.30、0.40、0.60、0.80、1.00μg/mL)虾青素,能够提高精液保存过程中总抗氧化水平。添加浓度为1.00μg/mL虾青素对精液氧化损伤防御效果最佳,其保存到第5 d时精液T-AOC为3.64 nmol/L,MDA含量为4.02 nmol/mL,ROS水平为1066.67,均显著高于对照组(P<0.05)。但是添加0.25μg/mL虾青素可以增强精液抗氧化酶的活性,当保存到第5 d时精液超氧化物歧化酶(SOD)为9.18 U/mL,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)为170.67μmol/L,过氧化氢酶(CAT)为6.99 U/mL,均显著高于对照组和其他试验组(P<0.05)。3.猪精液中添加不同浓度的虾青素,对精子运动参数的影响不是很大,添加0.25μg/mL虾青素组精子直线运动速度(VSL)略有提高,但是与对照组相比差异不显著(P>0.05);其曲线运动速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和头部侧位移动振幅(ALH)分别在第5 d、第3 d、第1 d显著高于对照组(P<0.05)。4.猪精液中添加不同浓度的虾青素可以提高精子的能量代谢水平。当稀释液中添加0.25μg/mL虾青素可以显著提高精液ATP水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性(P<0.05);0.30μg/mL虾青素组高线粒体膜电位精子比例增加。当保存至第5 d时,ATP水平为9.52nmol/10~8精子,LDH活性为2346.67 U/L。综上所述,猪精液常温保存稀释液中添加虾青素可以提高精液保存质量且虾青素最适添加浓度为0.25μg/mL。