大白菜根肿病抗性基因分子标记与定位

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大白菜的植物学分类为十字花科芸薹属,起源于中国,由于其丰富的营养价值和广泛的生态栽培类型,在我国得到广泛的种植。根肿病是由芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicaeWoron.)寄生而引起的一种土传病害,在世界范围内危害程度大且危害面积大。由于根肿菌是专性寄生在十字花科作物上,因此极大地威胁着十字花科作物的生产。大白菜栽培周期长,抗病品种少,因此与其他蔬菜如小白菜、日本芜菁、生菜等相比也极易受到根肿病的危害。根肿病目前在世界很多国家都发生已久且普遍严重,我国大白菜栽培面积大,遭受根肿病危害的程度也随之较大.因此选育抗根肿病的大白菜优良品种是当前最亟待解决的问题。在选育抗性品种过程中,开发与大白菜根肿病抗性基因紧密连锁的分子标记起着至关重要的作用。经调查,河南新野城郊乡是河南省唯一发病严重的区域,本实验在该地区进行田间抗性鉴定,为保证实验的准确性和重复性,种植前保证田间根肿菌分布均匀一致。室内抗性鉴定建立在河南省农业科学院园艺研究所,菌源也是来自河南新野。本研究利用收集到的6个F1代抗病品种材料自交后构建的F2代群体,利用室内和田间进行抗性鉴定,对F2群体的表型进行鉴定,分析了不同材料的根肿病抗性遗传规律,利用BSA(分离群体分组分析)法建立抗感池进行引物筛选,最终获得了与抗根肿病紧密连锁的分子标记,并对抗病基因进行了初步定位。结果如下:1.对6个F1代抗根肿病材料进行自交构建F2代群体,利用田间抗性鉴定和室内人工接种鉴定的方法对这6个F2代进行抗病性鉴定,结果6个F2代群体均表现出抗感分离,经卡方检验后均符合3:1的孟德尔遗传分离比,研究结果表明这6个F2群体中的根肿病抗性主要是由显性单基因控制。2.对这6个F2分离群体:Y635F2、Y636F2、Y637F2、Y642F2、Y664F2、Y665F2进行分子标记分析。通过400多对引物筛选得到与群体Y635F2抗性基因连锁的4个SSR标记GC1160,GC2360-2,GC2920-2F和SASS70;在群体Y636F2中通过筛选获得4个SSR连锁标记GC1160,GC2360-2,GC2920-2F,SASS70;在群体Y637F2中获得4个SSR连锁标记GC3070,GC2920-2F,SASS70,BGA06,以上获得的SSR标记均位于大白菜染色体A03上。群体Y642F2获得与抗病基因连锁标记为5个Indel标记BrID10781、BrID11233、BrID10867、BSA2、BSA7和2个SSR标记A08-S17、A08-S33,这5个标记均位于大白菜染色体A08上;群体Y664F2获得与抗病基因连锁的4个Indel标记BrID10781、BrID110265、BrID11233、BrID10867和2个SSR标记A08-S17、A08-S33,这6个标记也位于大白菜染色体A08上;在群体Y665F2中则未发现与抗病基因紧密连锁的分子标记。3.群体Y642F2和Y664F2的抗性基因定位在染色体A08上,其中群体Y642F2获得连锁的7个标记中最近的一个标记BSA2与抗性基因相距16.9cM,标记BrID10781与抗性基因相距48.0cM;群体Y664F2获得连锁的6个标记中,最近的一个标记A08-S17与抗性基因相距47.0cM,最远的标记BrID110265与抗性基因相距66.3cM。本研究利用6个F2分离群体针对河南发病最为严重的新野菌源进行了抗性鉴定,初步获得与根肿病抗性基因紧密连锁的分子标记,缩短了大白菜抗根肿病分子标记辅助选择育种的进程,同时该结果也为根肿病抗性基因的精细定位奠定了良好的基础。
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