虎源和狮源H5N1亚型流感病毒进化分析与HA基因重组犬2型腺病毒构建研究

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自2003年以来,H5N1禽流感(AI)在亚洲的大面积暴发已导致近亿只禽类感染死亡或被捕杀,并跨越种间障碍导致109人死亡。这些事件让人们担心H5N1AIV可能会进化成为引发流感大流行的病毒。2002年我们从发病死亡虎中分离到1株H5N1 AIV,这是首次发现H5N1 AIV能够自然感染除人以外的哺乳动物并且导致其发病死亡。在进一步的虎和狮AI感染情况调查中分离获得14株H5N1 AIV,对虎源和狮源流感病毒的生物学特性和基因进化进行了研究:人工感染实验表明所分离病毒对鸡、小白鼠和家猫均具有高致病性;全基因序列测定表明所分离病毒与H5N1亚型AIV高度同源(96%~100%),虎源和狮源流感病毒各基因节片具有一系列H5N1 AIV特征性遗传位点;受体结合特性检测表明15株病毒均保持着与AIV受体结合的特性,虎气管流感病毒受体以AIV受体类型为主。以犬2型腺病毒为载体,构建了表达流感病毒HA蛋白的重组活病毒,用其免疫猫可以诱导产生效价为1:8~1:16的中和抗体。这为哺乳动物H5N1亚型流感病毒重组活载体疫苗的研究提供了理论与技术基础。
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