碱性果胶酶的发酵生产及其在纺织前处理中的应用研究

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本文采用枯草芽孢杆菌BacillussubtilisWHS03-06生产碱性果胶酶,并对发酵产酶条件进行了优化研究。单因素和响应面优化法确定其最适产酶培养基组分为(g·L-1):玉米淀粉15,蛋白胨10,酵母膏5,KH2PO46,K2HPO4·3H2O12,CaCO34.8521,MgSO4·7H2O2,果胶6.1326,吐温-602.9557。最适培养条件为:培养基初始pH7.5,培养温度37℃,接种量10%,摇瓶装量为250ml的三角瓶中装25ml培养基。在最适条件下培养18h后酶活可达最大为57.33U/mL,比单因素优化后提高了17.2%。 采用硫酸铵盐析、透析的方法对发酵液进行了初步分离纯化。确定了硫酸铵分级沉淀先采用60%的饱和度去除杂蛋白,再采用90%的饱和度最大限度的收集碱性果胶酶。粗酶液经初步纯化后,比酶活提高1.9倍,酶活回收率达87.8%。对该酶进行部分酶学性质的研究表明:酶的最适反应温度为50~60℃。在此范围内具有较好的热稳定性。酶反应的最适pH为9.4,在pH9.0-10.0范围内具有较好的稳定性。该酶的最适作用底物为聚半乳糖醛酸。Cu2+、Fe2+、Zn2+、Ba2+对酶有一定的抑制作用,Mg2+、Ca2+对酶有一定的激活作用,而Na+对酶几乎没有影响。 确定了酶精练工艺的最佳条件:沸水预处理30min后,在pH9.4、温度为50℃、酶用量1.0g·L-1、浴比为1:20、精练助剂TX-10添加量为0.25g·L-1、转速100r·min-1条件下处理90min,精练效果最好。对比碱精练工艺,棉织物的性能分别为:棉织物上的果胶去除率分别为60%和99%,织物的减重率分别为2.7%和4.51%,润湿性分别为4.2s和3.0s,织物强力分别为28.93cm和26.22cm,精练后废液的pH分别为9.0和12.7。酶法精练后的织物具有较好的润湿性,棉纤维损伤小,手感较好,废水具有较高的可生化性。
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