茶黄素双没食子酸酯的酶法制备与分离提纯

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茶黄素是指红茶中可以溶于乙酸乙酯的物质,它呈橙黄色,是由多酚类及其衍生物的氧化聚合而成的一类化合物的总称。茶黄素是一种天然活性物质,具有很广阔的开发前景,它拥有抗氧化、抗肿瘤、消炎抗菌等药理功能和保健作用。本文对茶黄素单体—茶黄素双没食子酸酯(TFDG)的酶促氧化制备及分离纯化进行了初步的研究,结果如下:  (1)茶黄素酶促氧化的制备。以儿茶素为底物,丰水梨为酶源,控制反应条件为pH=5.0,、反应温度为30℃、底物浓度为1.75 g/200mL、酶源浓度50g/200mL,通氧量为0.4L/min,反应时间控制在50min内,其中缓冲液采用磷酸氢二钠-柠檬酸。最终反应得到茶黄素粗品的纯度约为40%。  (2)茶黄素粗品在NKA-9大孔树脂中的分离。试验优化了样品的上样量、洗脱剂及流速,结果发现NKA-9大孔树脂分离的最佳条件为上样量5g/100mL、流速2mL/min,30%乙醇去杂,60%乙醇解析。  (3)本文优化了聚酰胺纯化TFDG的条件,结果发现甲醇、氯仿、丙酮的比例为5∶5∶8,流速为2mL/min时分离效果最好。经HPLC检测TFDG的纯度为93.17%,得率为15.87%。
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