【摘 要】
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牦牛为西藏地区的牧民提供肉、奶、毛、皮、草、燃料等生活必需品。然而冬季西藏地区饲草质量差,牦牛摄取的能量和蛋白质往往低于维持所需,经过一个冷季,牦牛体重降低约25%,严重影响牦牛行业的可持续发展。牦牛西繁南育,可以解决西部牧区草畜矛盾,改善牦牛肉质差、经济效益低的问题。然而运输通常会造成运输应激,进而造成动物机体的炎症以及各种病症。维生素C（VC）和维生素E（VE）是有效的抗氧化剂,价格低廉,易于
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牦牛为西藏地区的牧民提供肉、奶、毛、皮、草、燃料等生活必需品。然而冬季西藏地区饲草质量差,牦牛摄取的能量和蛋白质往往低于维持所需,经过一个冷季,牦牛体重降低约25%,严重影响牦牛行业的可持续发展。牦牛西繁南育,可以解决西部牧区草畜矛盾,改善牦牛肉质差、经济效益低的问题。然而运输通常会造成运输应激,进而造成动物机体的炎症以及各种病症。维生素C（VC）和维生素E（VE）是有效的抗氧化剂,价格低廉,易于获得,对细胞代谢的副作用较少。它们可以通过减少氧化应激来减少各种器官的损伤,有助于减少个体运输压力。代谢组学是以指标分析为基础,高通量检测为手段,通过研究生物体内代谢物的种类与数量及其变化规律来阐述机体在正常生命状态及环境变化后的代谢过程。本文基于超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱（UHPLCQTOFMS）的代谢组学技术对VC/VE对牦牛运输应激的缓解作用进行研究。实验一VC/VE对牦牛运输应激的体重和生化指标影响本试验首先分析牦牛运输后立即应用VC或VE注射液对体重和血液生化的作用。选取10头健康的公牦牛,将牦牛从西藏类乌齐县运至重庆荣昌市的育肥场,造成运输应激。到场后,5头牦牛在运输后注射维生素C、5头牦牛在运输后注射维生素E,并在注射前（对照组）以及注射十天后（实验组）分别收集注射VC/VE牦牛体重、血液,评估体重和生化参数。统计VC对照组和VE对照组、VC对照组和VC组、VE对照组和VE组、VC组和VE组之间各个指标差异。结果发现,VC注射组牦牛的平均日增重高于VE注射组。在生化指标中,与各自的对照组相比,两种注射方法的肝胆功能指标（谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）和间接胆红素（IDBIL））均显著下降（P＜0.05）。相对于VE组,VC组的AST/ALT和胆汁酸（TBA）显著下降（P＜0.05）,提示VC注射比VE注射有更好的护肝作用。相对于对照组而言,VC注射组的全程C反应蛋白（CRP）显著下降（P＜0.05）。实验二VC/VE对牦牛运输应激的代谢组学的影响为进一步探究VC/VE对运输应激牦牛血浆代谢物的影响,基于UHPLC-QTOFMS的非靶向代谢组学技术检测各组牦牛血浆代谢谱,结合多元和单变量统计方法分别分析VC对照组和VC组、VE对照组和VE组、VC组与VE组牦牛血浆中的差异代谢物,并进行相关生物信息学分析,揭示差异代谢物参与的生物学通路,并结合各组的差异代谢产物和参与的生物学通路,并绘制代谢通路图。结果发现,VC对照组与VC组共鉴定出156种差异代谢物,多数差异代谢物在VC注射后显著上调,包括溶血磷脂酰胆碱、鞘脂、柠檬酸、苹果酸、牛磺酸以及色氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、谷氨酸及其代谢产物,而棕榈酸等脂质代谢产物显著下调。差异代谢途径包括苯丙氨酸的代谢;甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸的代谢;丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸的代谢。VE对照组与VE组之间共鉴定出119种差异代谢物,多数差异代谢物在VE注射后显著上调,包括鞘脂、柠檬酸、苹果酸、牛磺酸以及苯丙氨酸及其部分代谢产物,而溶血磷脂酰胆碱、花生四烯酸等脂质代谢产物和皮质醇显著下调。代谢产物差异代谢途径包括甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸的代谢;丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸的代谢;三羧酸循环（TCA）;初级胆汁酸合成;缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成和精氨酸生物合成方面也有明显聚集。VC组与VE组之间共鉴定出33种差异代谢物,VC组有28个代谢物的血液水平显著升高,包括苯丙氨酸、色氨酸及其代谢产物,而尿素和柠檬酸等显著下调。差异代谢途径包括丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸的代谢;精氨酸生物合成;苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢;甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢。结论:（1）与VC和VE注射组相比,VC组的AST/ALT和胆汁酸（TBA）显著下降（P＜0.05）,VC注射液在运输应激下能更好地保护肝脏。与VE注射组,VC组的更多氨基酸和氨基酸代谢物显著上升,相比VE能动员更多的氨基酸合成GSH。（2）VE对脂质的过氧化保护作用比VC更好,同时能减少氧化应激的标志物（皮质醇）。
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