在真核生物中,retromer是定位在内涵体的一类复合体,并在蛋白转运中发挥重要功能。但是,这类复合体介导的转运事件是否参与病原真菌的发育和致病过程尚不清楚,而且不同病原真菌对其寄主的致病侵染方式也存在较大的差别。为较为详细的了解retromer复合体在病原真菌中对致病性的调控功能,我们以两类侵染方式不同的植物病原真菌——稻瘟病菌和禾谷镰刀菌为研究对象,分别探讨了 retromer复合体的生物学功能。稻瘟病菌引起的稻瘟病是世界水稻生产上的一种毁灭性真菌病害,该病害严重限制和威胁全球的水稻生产。稻瘟病菌在致病过程中,能否分化出功能性的附着胞决定了该菌是否能够成功侵入寄主。我们的研究发现Vps35/retromer对稻瘟病菌附着胞介导的侵染起着至关重要的作用。稻瘟病菌MoVPS35基因的缺失致使糖原的降解和脂质体的转运受阻,影响了分生孢子中细胞核的降解以及附着胞内膨压的产生。更为有趣的是,敲除MoVPS35严重影响了附着胞发育过程中点状自噬体(RFP-Atg8标记)的形成,并且在氮饥饿条件下也显著减少了经内源水解酶剪切或脂化后的MoAtg8数量。△Movps35突变体表型缺陷与稻瘟菌中已报道的△Moatg8突变体极为相似。进一步的共定位和Co-IP实验均证实了MoVps35-GFP和RFP-MoAtg8能够在体内相互作用。借助活细胞成像显微拍摄技术,我们发现MoVps35-GFP以点状形式在液泡膜上或周围进行高速的转运,推测MoVps35可能通过在液泡膜周围回收剪切过的MoAtg8进而调控自噬体的形成。此外,我们还证实MoVps35能和retromer复合体成员MoVps26及MoVps29相互作用,共同调控附着胞介导的侵染。因此,MoVps35/retromer通过参与调控稻瘟病菌中自噬的发生进而影响附着胞介导的侵染致病过程。禾谷镰刀菌引起的赤霉病不仅影响小麦的安全生产,其产生的真菌毒素严重威胁农产品质量安全。通过实时显微电影拍摄技术,我们证实了 retromer复合体的核心元件FgVps35(由FgVps35-GFP标记)在细胞中以囊泡的形式进行快速转运。进一步共定位分析,发现超过60%的FgVps35-GFP以离散的点状形式分布于液泡膜上,少于10%的FgVps35-GFP和TGN marker FgKex2-mCherry共定位。这些结果表明FgVps35在禾谷镰刀菌中将液泡膜作为供体膜,以囊泡的形式向TGN运转。为明确FgVps35的转运特性和生理学功能的相关性,我们用微管抑制剂诺考达唑处理菌体后,发现FgVps35在细胞内失去了转运能力,与此同时孢子的萌发和菌体的生长受到明显的抑制,表明了转运和生长间可能存在一定的关联。进一步用遗传学方法对FgVPS35基因进行敲除,我们发现敲除突变体的生长、产孢、毒力和子囊孢子的产生均受到影响。通过酵母双杂交分析,我们明确了组成retromer复合体各个成员(FgVps35、FgVps26、FgVps29、FgVps17 和 FgVps5)间的互作关系。敲除 retromer 复合体中各个成员基因产生了 △Fgvps35相似的表型,包括生长、有性和无性发育及致病性方面的缺陷。综上所述,我们的结果证实了 retromer复合体存在于禾谷镰刀菌中并且通过介导细胞内转运事件进而调控禾谷镰刀菌的生长发育及致病性。