【摘 要】
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目的:探究系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)患者血浆对健康者骨髓来源的间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)免疫抑制作用的影响。 方法:实验采用添加SLE
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目的:探究系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)患者血浆对健康者骨髓来源的间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)免疫抑制作用的影响。 方法:实验采用添加SLE患者富集血浆或胎牛血清的细胞培养体系(胎牛血清作为对照组),在体外共同培养SLE患者来源的B淋巴细胞与健康者骨髓来源的MSCs,检测MSCs对B淋巴细胞的增殖能力和分化成熟的影响。采用细胞增殖试验检测分析B淋巴细胞的增殖能力情况;使用流式细胞仪检测B淋巴细胞的表面标志物,统计分析B淋巴细胞的分化成熟情况。实验数据统计分析:采用SPSS12.0软件进行学生t检验统计学分析,P<0.05视为两组差异有统计学意义。 结果: 1、MSCs的分离、扩增培养和诱导分化:实验成功培养获得健康骨髓捐献者来源的MSCs;①MSCs经过流式细胞仪检测结果显示,高表达CD44、CD73、CD90、和CD105,不表达CD34、CD45、CD14和CD106;②通过添加特殊诱导剂诱导培养MSCs后,成功分化为成脂细胞和成骨细胞。 2、正常MSCs可以抑制SLE患者来源B淋巴细胞的增殖(脂多糖为增殖刺激分子)。 3、SLE患者富集血浆能够抵制正常MSCs对SLE患者来源B淋巴细胞的增殖抑制作用(脂多糖为增殖刺激分子)。 4、正常MSCs可以抑制SLE患者来源B淋巴细胞的成熟:在胎牛血清培养系统中,加入MSC干预后,SLE患者来源B淋巴细胞表面CD27与CD38的表达量下调,CD19的表达水平无明显影响。 5、SLE患者富集血浆能够抵制正常MSCs对SLE患者来源B淋巴细胞成熟的抑制作用:在SLE患者富集血浆培养系统中,加入MSCs干预后,SLE患者来源B淋巴细胞表面CD27与CD38的表达量明显上调,CD19的表达水平受到抑制作用。 结论:正常MSCs可以抑制脂多糖刺激的SLE患者B淋巴细胞的增殖与成熟,调节B淋巴细胞亚群所占比例。而SLE患者富集血浆却能够抵制正常MSCs对B淋巴细胞的免疫抑制作用,这将负向干扰正常MSCs移植对SLE的治疗效果。
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