血细胞计数是临床实验室最常见的检测之一,可用于筛查及评估病症。将血细胞计数用于实时、实地的检测,可以实现快速、方便的诊断和治疗反馈,这种检测理念被称为“床旁诊断”（Pointof Care Testing）。基于该理念,开发便携式的血细胞计数方法具有十分重要的意义。课题组前期的工作已经验证了基于大视场显微成像的血细胞计数的方法和概念。但是,这种方法采用稀释血样的策略,样品池中被测白细胞的统计数目较少,造成三分类的趋势不清晰,降低了细胞计数的准确性。同时,该方法需使用商业样品池,存在环保、成本等各方面因素的缺陷。本论文以便携式血细胞计数为目标,基于大视场显微成像的技术,提出了直接制备不稀释血样的策略,以及相应的两种制作成像样品池的方案,用于更准确地检测白细胞的三分类。本论文的主要内容如下:第一,微接触印刷法制作样品池。该方法使用弹性印章转移玻璃胶来制作微图案,用以密封载玻片和盖玻片以及控制样品池厚度。该样品池厚度约为20 μm,对于不稀释的血样,白细胞在样品池中呈密度适宜的单层分布,且总的统计数目较多。经大视场成像以及数据处理后得到准确的白细胞三分类数值,验证了微接触印刷法制作的样品池可成功用于血样的白细胞三分类计数。第二,亲水通道法制作样品池。该方法用浸泡法制作亲水通道,用微接触印刷法制作疏水边缘。低稀释倍数的血样在亲水作用下自动流入样品池,试剂中包含甘油组分以保持环境的湿度,维持细胞的形态。白细胞在样品池中呈密度适宜的单层分布,且总的统计数目较多。该方法的制作流程相较微接触法更加简单,且使用过程更加方便,有望实现标准化的制作与操作流程。经大视场成像以及数据处理后得到准确的白细胞三分类数值,验证了亲水通道法制作的样品池可成功用于血样的白细胞三分类计数。第三,将上述两种样品池用作临床样品的白细胞三分类计数分析。测试值与临床值之间具有较好的一致性,且测试值的重现性较好。综上所述,本论文基于大视场显微成像的便携式血细胞计数方法,为成像样品池的开发提供了有效的思路和技术手段。