葡萄、丝瓜伤流液的抗氧化等活性检测与抗氧化物质的初步探讨

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葡萄伤流液在维吾尔族民间有数千年的保健应用历史,但迄今为止,还一直仅在维吾尔族民间使用,没有任何文献研究正式报道其可能具有的作用及其作用机理,更没有相关产品出现于市场。丝瓜伤流液在中医药上被称为“天罗水”,也已有很长的应用历史,但国内外学者仅将目光锁定丝瓜果实和地上部分植物体,除少量抑茵研究外,丝瓜伤流液的其它生物学活性相关研究尚未见报道。鉴于此,为寻找新的可应用于人类保健等方面的植物资源,本文以生长于新疆和田地区的葡萄(Vitis vinfersa L)品种--红葡萄和生长于江苏淮安的丝瓜(Luffa cylindrica Roem)的伤流液为材料,检测两种伤流液在体外对羟自由基(-OH)、超氧阴离子自由基(O2-)、DPPH自由基等的清除活性,检测它们抑制由UV和H2O2诱导的鸡红细胞溶血以及对卵黄脂质过氧化的抑制活性,从而为葡萄和丝瓜伤流液的综合利用开发提供依据。 对葡萄伤流液的检测结果表明:葡萄伤流液原液在体外对体系中-OH的清除率高达92.59%,对UV诱导溶血的的抑制也达到46.77%,而所检测的其它抗氧化能力均较弱。其-OH清除能力耐高温、高压,但对空气敏感。葡萄伤流液的抗氧化特性与常见的天然抗氧化剂的特性不同,显示其中的抗氧化物质与常见的抗氧化物质不同。 为推测其中抗氧化物质的化学本质,本文不仅检测与分析了常见高活性抗氧化物质在葡萄伤流液中的含量,还检测了葡萄伤流液的UV、荧光和红外光谱、抗氧化物质的极性与分子量等。结果显示:葡萄伤流液中的抗氧化物质是蛋白质、多肽、氨基酸、维生素、多糖、还原糖以及黄酮类等含苯环结构的化学物质的可能性很小,该抗氧化物质不是已知的抗氧化物质;该物质极性较大、可能含有-OH和不饱和双键、分子量小于1000 Da。其确切的化学成分还有待进一步的研究。 对丝瓜伤流液的检测结果表明:丝瓜伤流液原液在体外对体系中-OH的清除率为60.80%,对卵黄脂质过氧化和对UV诱导溶血的抑制率分别为58.98%和56.94%;但对DPPH的清除率和对H2O2诱导溶血的抑制率较低,分别为34.16%和24.52%:对O2-的清除能力极弱。进一步检测其体外抗氧化的稳定性显示:丝瓜伤流液的清除DPPH能力和对卵黄脂质过氧化的抑制能力较耐高温,而清除-OH的能力对高温的敏感度稍高。丝瓜伤流液对卵黄脂质过氧化的抑制能力对空气敏感度最低,DPPH清除能力对空气较敏感,-OH清除能力对空气敏感度最高。以上结果显示,丝瓜伤流液中可能含有多种抗氧化物质。经过高温处理后的丝瓜伤流液对空气的敏感程度都有所下降,这一性质大大提高了丝瓜伤流液的应用价值。丝瓜伤流液仅在酸性条件下表现出清除DPPH的能力;在自然pH下清除DPPH的能力最强。 丝瓜伤流液的UV和红外光谱、抗氧化物质的极性与分子量等的实验结果显示:丝瓜伤流液中的抗氧化物质是蛋白质、维生素、多糖、还原糖以及黄酮类等含苯环结构的化学物质的可能性也很小,不是丝瓜中已知的抗氧化物质;该物质可能含有-OH和不饱和双键。其中清除DPPH的活性物质的极性较大、分子量小于1000 Da。伤流液中的抗氧化物质的确切的化学成分还有待进一步的研究。 此外,有文献表明多个抗氧化物质具有美白功能,且有媒体称丝瓜伤流液具有美白功效。为确定丝瓜伤流液的美白功效以及检测葡萄伤流液是否具有美白功能,本文还检测了两种伤流液的抑制酪氨酸酶的活性。结果表明:丝瓜伤流液原液的抑制酪氨酸酶的活性较低,但2倍和5倍的浓缩液具有显著的抑制酪氨酸酶活性的效应,显示丝瓜伤流液确实具有一定的美白效果;而葡萄伤流液的原液与10倍的浓缩液均没有检测到抑制酪氨酸酶的活性,表明葡萄伤流液美白功能较弱。 有研究表明丝瓜伤流液对部分真菌有抑制作用,为进一步检测丝瓜伤流液对真菌抑制的普遍性和对细菌的抑制效应,以及检测葡萄伤流液是否具有抑菌效应,本文利用牛津杯法,检测了两种伤流液对三种常见细菌[大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)]和三种常见真菌[根霉(Rhizopus)、黑曲霉(Aspergillus,niger)和绳状青霉(Penicillium)]的抑制活性,但结果显示两种伤流液对上述几种细菌和真菌均无明显抑制作用。
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