目的：套细胞淋巴瘤(Mantle cell lymphoma，MCL)是一种恶性程度较高的非霍奇金淋巴瘤(Non-hodgkin lymphoma，NHL)，患者中位总生存期仅3～5年。因其临床表现复杂，疾病进展多样以及经常出现复发，目前尚无治愈方案。常规化疗药物对MCL患者毒副作用较大，且易发生耐药，因此，亟待寻找新的治疗方法和策略。多聚ADP核糖聚合酶(Poly-ADP-ribose polymerase，PARP)抑制剂是一种新型靶向抗肿瘤药物，通过影响肿瘤细胞的DNA损伤修复发挥抗肿瘤作用，且对同源重组(Homologous recombination，HR)修复功能障碍的患者效果更佳。课题组前期研究发现，热休克蛋白90(Heat shock protein 90，HSP90)抑制剂能影响肿瘤细胞的DNA损伤修复，因此，我们希望探索其是否能与PARP抑制剂联合使用增强PARP抑制剂的细胞毒性作用。本课题旨在研究第二代HSP90抑制剂Ganetespib能否增强PARP抑制剂Olaparib对MCL的毒性作用及其机制。
　　方法：首先用HSP90抑制剂Ganetespib处理MCL细胞系Jeko-1和REC-1，通过转录组测序检测其DNA损伤修复相关基因的变化情况，同时用qRT-PCR进行验证。然后用MTT法检测Ganetespib处理是否增强PARP抑制剂Olaparib对MCL细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术和Westernblot检测Ganetespib和Olaparib联合用药对MCL细胞周期凋亡的影响。使用免疫荧光及Westernblot检测联合用药对MCL细胞DNA损伤及HR修复的影响。最后，通过MCL小鼠皮下移植瘤模型，研究联合用药对裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用和对HR修复的影响。
　　结果：转录组测序、qRT-PCR和WesternBlot实验结果显示，Ganetespib影响了套细胞淋巴瘤细胞Jeko-1和REC-1的HR修复相关的基因及蛋白表达；且Ganetespib处理后，明显增强了Olaparib对MCL细胞系的增殖抑制作用；同时也增强Olapaib诱导MCL细胞凋亡作用及G2/M期阻滞作用；进一步研究发现，Ganetespib处理能增强Olaparib诱导的DNA损伤作用及抑制HR修复功能。因此，可能导致细胞DNA损伤堆积，从而导致细胞凋亡。联合用药组的细胞周期相关蛋白CyclinD1和CDK4显著下降，细胞周期阻滞作用更为显著。小鼠体内实验结果表明，Ganetespib和Olaparib联合使用可明显抑制小鼠皮下MCL移植瘤的生长，并且抑制了肿瘤组织内RAD51的蛋白水平。
　　结论：体内外研究结果证明，HSP90抑制剂Ganetespib通过抑制MCL细胞的DNA损伤修复蛋白而抑制其修复功能作用，并增强Olaparib对MCL细胞的增殖抑制、凋亡及细胞周期阻滞，同时在MCL细胞中增强Olaparib诱导的DNA损伤作用，由于损伤的DNA得不到及时的修复，导致细胞的死亡。该研究为MCL的治疗提供了新方法，也为MCL的临床用药提供新的思路。