【摘 要】
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目的:明确TFF3通过激活NF-κB通路介导胃癌细胞无限增殖的机制,探讨七方胃痛颗粒对其调节效应。 方法:本实验分为两部分进行,第一部分:胃癌细胞 SGC-7901常规培养,利用RT-
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目的:明确TFF3通过激活NF-κB通路介导胃癌细胞无限增殖的机制,探讨七方胃痛颗粒对其调节效应。 方法:本实验分为两部分进行,第一部分:胃癌细胞 SGC-7901常规培养,利用RT-PCR、Western blot方法测定TFF3、NF-κB、ERK的mRNA及蛋白表达;ELISA测定上清液中 NF-κB的含量;MTT法测定24h、48h时段细胞增殖率。然后将七方胃痛颗粒药液加入细胞培养液中SGC-7901培养24h、48h,用上述同样方法,分析七方胃痛颗粒对胃癌细胞SGC-7901生长及细胞中上述各因子mRNA和蛋白表达情况。第二部分:采用RNA干扰技术沉默SGC-7901细胞中NF-κB p65基因的表达,阻断其下游信号传导,明确NF-κB通路介导细胞无限增殖诱发胃癌机制,及七方胃痛颗粒对TFF3-NF-κB通路介导胃癌细胞增殖的抑制作用。 结果:RT-PCR、Western Blot、ELISA结果显示胃癌细胞中,TFF3、NF-κB、ERK的mRNA及蛋白都有较高表达,经过七方胃痛颗粒作用后, TFF3、NF-κB、ERK因子的表达水平下降,且具有时间和药物浓度依赖性(P<0.05);MTT实验结果显示七方胃痛颗粒能有效抑制胃癌细胞的生长,且与时间和浓度呈负相关性(P<0.05)。经RNA干扰技术沉默NF-κB p65基因后,NF-κB的表达降低,MTT结果提示胃癌细胞生长受到抑制, RT-PCR及Western Blot显示下游TFF3因子的表达下降,经七方胃痛颗粒干预后,细胞生长和其因子表达的进一步降低,且与时间和浓度负相关性(P<0.01)。 结论:胃癌细胞SGC-7901中TFF3、NF-κB、ERK均有表达;七方胃痛颗粒能有效抑制胃癌细胞增殖及细胞中TFF3、NF-κB、ERK因子的表达,且有作用时间和浓度的依赖性;沉默NF-κB p65后可以下调TFF3的表达,说明TFF3的生理功能发挥与NF-κB通路调节有关,表明胃癌细胞增殖过程可能是通过TFF3/NF-κB通路发挥作用的。而七方胃痛颗粒能下调TFF3、NF-κB、ERK的表达,说明其作用机制的发挥可能是通过抑制TFF3-NF-κB增殖信号转导通路实现的。
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