目的:雷帕霉素对卵母细胞体外成熟过程可能存在积极影响,但其有效浓度、产生的具体效应、背后的机制以及在临床的应用前景和安全性等都有待进一步的探究。故本研究的目的在于:全面评估雷帕霉素在最佳浓度下对小鼠卵母细胞体外成熟后质量和发育潜能的影响,并对可能的机制进行探究,同时对雷帕霉素改善人类卵母细胞体外成熟结局的有效性进行评估。方法:收集雌性ICR小鼠的未成熟卵母细胞进行体外培养,在培养液中添加不同浓度的雷帕霉素（1 n M～10μM）,通过比较成熟率和激活率,筛选最佳作用浓度。随后,在处理组的培养液中加入最佳浓度的雷帕霉素,对比分析处理组与对照组中体外成熟卵母细胞的孤雌激活后发育情况、纺锤体组装、染色体排列、线粒体膜电位水平以及活性氧水平。为探索相关机制,对处理组和对照组卵母细胞的DNA损伤水平进行检测和对比,并评估mTOR激活剂对雷帕霉素作用的影响,同时对mTORC1通路相关基因、纺锤体组装相关基因、抗氧化基因、DNA损伤修复关键基因的表达水平进行检测和对比分析。此外,收集临床常规促排周期中未成熟的人卵母细胞,使用雷帕霉素对体外培养过程进行干预,对比分析处理组和对照组中卵母细胞的体外成熟率、正常受精率、优质胚胎率、囊胚形成率以及DNA损伤水平。结果:雷帕霉素对卵母细胞体外成熟过程的影响与其浓度密切相关。10 nM雷帕霉素处理组的小鼠卵母细胞在体外成熟后呈现出较高的成熟率和孤雌激活率,故选择10 nM作为添加雷帕霉素的最佳浓度。在随后的培养中,10 nM雷帕霉素组卵母细胞来源的激活胚胎卵裂率和囊胚形成率也较对照组显著升高,且与对照组相比,10 n M雷帕霉素组的成熟卵母细胞染色体排列有所改善,活性氧水平显著降低,而纺锤体形态和线粒体膜电位水平则未见明显差异。进一步的机制研究发现,雷帕霉素组中卵母细胞IVM后的DNA损伤水平显著降低,与此同时,mTORC1通路受到抑制,抗氧化基因NRF2、DNA损伤修复基因ATM、ATR、DNAPK和RAD51的m RNA水平均较对照组显著升高。在人类卵母细胞体外成熟的过程中,10 n M雷帕霉素的添加也能够显著提高卵母细胞的生发泡破裂率、48 h成熟率以及受精后的优质胚胎率,并降低DNA损伤水平。结论:10 nM雷帕霉素能够显著改善小鼠和人类体外成熟卵母细胞的质量和发育潜能,其机制可能在于减轻氧化应激的同时促进DNA损伤修复,以减少卵母细胞在体外环境中产生的DNA损伤,维持其基因稳定性,从而改善体外成熟结局。