弓形虫(Toxoplasma)寄生于人体和许多动物组织细胞内，可感染190多种哺乳类动物，传染源主要是猫科动物。由其引发的弓形虫病(Toxoplasmosis)在全世界范围内广泛流行，给人类健康和畜牧业发展造成了不可估量的损失。关于弓形虫有效保护性基因的筛选工作国外内都正在进行，目前为止还没有有效的疫苗。致密颗粒蛋白（Dense granule protein）是弓形虫体内重要的分泌代谢抗原，在动物实验感染中具有较强的免疫原性，到目前为止,已知有10种不同的速殖子致密颗粒蛋白（GRA1-GRA10）。在弓形虫病的诊断及免疫预防中具有潜在的价值。其中GRA3能被抗弓形虫单克隆抗体2H11识别，可以刺激机体产生B细胞免疫应答，该抗原可用于弓形虫病诊断和作为疫苗的候选分子。　　本研究利用PCR技术扩增了687bp RH株GRA3基因片段，对所克隆的GRA3基因序列与已发表的序列（AF414079）进行比较分析，结果表明同源性达到99.8％，证明了该基因片段为弓形虫GRA3基因。并将GRA3基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1，经酶切及PCR鉴定，证明成功构建了表达载体pGEX-GRA3。将构建好的表达载体，经1 mmol/L的IPTG诱导，在大肠杆菌BL21中进行表达，经过6 h表达量达到高峰。融合蛋白GST-GRA3的分子量为50 ku，大部分以可溶性蛋白的形式存在。Western-Blotting免疫印记分析，融合蛋白与弓形虫阳性血清发生特异性反应，说明该蛋白具有一定的抗原性。