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目的:建立RNA干扰(RNA interference-RNAi)抑制柯萨奇病毒腺病毒受体(coxsackievirus and adenovirus receptor, CAR)基因表达的肺癌NCI-H520稳定表达细胞系,通过平板克隆形成实验、transwell侵袭及迁移实验初步探讨CAR失表达对人肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞增殖与侵袭迁移的影响。方法:1将针对CAR mRNA序列设计的三个小干扰RNA重组质粒分别以脂质体转染至人肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞,并经G418抗性筛选得到稳定细胞系。2采用半定量RT-PCR和Western blot检测3个稳定表达细胞系和阴性对照、空白对照组细胞中CAR mRNA利蛋白质的表达情况,判断抑制效果并筛选出抑制效果最佳的一组稳定表达细胞系。3用平板克隆形成实验和transwell侵袭及迁移实验观察RNA干扰抑制CAR基因表达对NCI-H520肺癌细胞增殖与侵袭迁移的影响。结果:1筛选得到三组抑制CAR基因表达的NCI-H520稳定细胞系。2半定量RT-PCR和Western blot结果显示,三组稳定细胞系中CAR mRNA和蛋白质表达均有不同程度的下降。其中shRNA-2抑制作用最强,其对CAR mRNA和蛋白质表达的抑制率分别达到82.5%和79.8%。3平板克隆形成实验显示,shRNA-2抑制CAR基因表达后NCI-H520细胞的增殖能力有所下降,但是其差异无统计学意义(P>0.05), transwell侵袭及迁移实验显示NCI-H520细胞侵袭迁移能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1筛选出了抑制CAR基因农达效果最佳的一组shRNA,并建立了能稳定而有效抑制CAR基因表达的肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞系。2抑制CAR基因表达后,NCI-H520细胞侵袭及迁移能力显著受到了抑制,初步证实了CAR在肺癌细胞侵袭迁移过程中的重要作用。3抑制CAR基因表达后,NCI-H520细胞增殖能力的变化不明显,其原因和机制还有待于深入研究,CAR对肺癌细胞分裂增殖的影响还有待于进一步研究。