瓜尔胶降解菌的筛选及其产酶研究

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瓜尔胶属于甘露聚糖类,在油田开采中用作压裂液的增稠剂,可使压裂液具备足够粘度而注入地层。压裂液需破胶,即增稠剂降粘。生物酶破胶法是利用β-甘露聚糖酶降解增稠剂而破胶,是一种高效、环保、专一性强的破胶方法。本文从被压裂液污染的土壤和水体中采集样品,通过富集培养,分离筛选出两株瓜尔胶高效降解菌,命名为AS-6和AS-12;并对筛选出的AS-6和AS-12菌株进行了发酵参数、产酶条件及酶学性质等研究,得到如下结果:(1)AS-6和AS-12(接种量为3%)两株降解菌株能产生高效降解瓜尔胶的胞外酶,分别在48h和56h内能完全降解50ml含0.5%瓜尔胶。(2)AS-6最佳产酶条件为:0.7%瓜尔胶、0.8% NH4Cl、1.2%蛋白胨、120r/m转速、50ml/250ml装液量、培养温度45℃,最高酶活达到34.38U/ml,是优化前的2.7倍;AS-12最佳产酶条件为:0.7%瓜尔胶浓度、0.8% NH4H2PO4、0.8%酵母膏、5.0初始pH值、50ml/250ml装液量、培养温度45℃,最高酶活达到21.95U/ml,是优化前的2.1倍。(3)在最佳培养条件下,AS-6菌的产酶能力比AS-12菌强。(4)ASE-6酶和ASE-12酶最适反应温度分别为70℃和55℃;ASE-6酶在低于50℃保温20min后仍具有70%以上的酶活,ASE-12酶在低于40℃保温120min还有76%以上的酶活。ASE-6酶和ASE-12酶最适pH值分别为6.0和4.5。Na+、Mg2+、Ca2+、Cu2+、Zn2+、Mn2+对ASE-6酶具有激活作用,其中Mg2+的激活作用最明显;而Li+、Co2+、Ag2+、Al3+具有抑制作用,其中Ag+抑制作用最强烈。Na+、Mg2+、Ca2+、Mn2+、Al3+对ASE-12有激活作用,Ca2+激活作用最大;而Cu2+、Zn2+、Co2+、Ag+则有抑制作用,Zn2+抑制作用最明显。SDS和EDTA对ASE-6酶和ASE-12酶都有强烈的抑制作用,二甲基亚砜对ASE-12有激活作用。
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