虎眼万年青(Ornithogalum Ait)是百合科虎眼万年青属多年生草本植物,具有清热解毒、消坚散结的功效,可治疗无名肿毒、肝炎、肝硬化、肝癌等。以虎眼万年青为君药的复方万年青胶囊对于肺癌、胃癌、肝癌等有良好的治疗作用。据文献报道,虎眼万年青多糖(OCAP)具有优良的抗肿瘤活性,并且在虎眼万年青中含量较高,但目前对虎眼万年青的研究中,所选用的药物多是虎眼万年青的简单提取物,并且研究方向主要集中在OCAP的提取工艺优化研究、OCAP对荷瘤小鼠的免疫系统的影响以及对体内、体外肿瘤细胞增殖的抑制作用,很少涉及到OCAP的结构修饰和结构特征研究。研究表明,硒多糖具有硒与多糖二者的活性,总体生物活性要高于二者单独使用,作为一种新兴的抗肿瘤药物逐渐成为了研究的热点。因此本文将虎眼万年青多糖与无机硒亚硒酸钠结合成为硒多糖,优化其富硒工艺,观察硒化后虎眼万年青硒多糖的理化性质及初高级结构结构特征,研究其对H22荷瘤小鼠体内抗氧化活性的影响。首先,本文对虎眼万年青硒多糖进行制备并对硒化工艺进行优化。以虎眼万年青乙醇提取后的药渣为原料,采用水提醇沉法提取虎眼万年青粗多糖,木瓜蛋白酶-Sevag联用法除去蛋白质,双氧水法除去色素,分步醇沉法及DEAE-52柱层析法对虎眼万年青多糖进行纯化,得到最优组分的虎眼万年青多糖(OCAPIIA)。将OCAPIIA以硒含量为指标,采用响应面法对OCAP的最优硒化工艺进行研究。最优硒化工艺条件为反应时间8.09h,反应温度71℃,Na2SeO3与OCAPIIA质量比0.97g/g。此工艺条件下得到的虎眼万年青硒多糖的硒含量为3.137mg/g。其次,考察了虎眼万年青硒多糖的理化性质和部分结构特征。利用苯酚硫酸法、气相色谱分析、扫描电镜对Se-OCAPIIA的理化性质和结构特征进行研究。结果表明,Se-OCAPIIA为固态白色絮状粉末,无味,易溶于温水、热水、盐水,溶于酸、碱溶液,不溶于甲醇、乙醇、正丁醇、丙酮、石油醚、甲苯等有机溶剂。苯酚-硫酸反应呈现深棕红色,证明Se-OCAPIIA中含打多糖。硒化后的Se-OCAPIIA形貌与OCAPIIA相比发生了变化,OCAPIIA为带状、片状、条状等,Se-OCAPIIA形貌主要为球状、絮状。Se-OCAPIIA的单糖组成及摩尔比为D-葡萄糖:D-甘露糖:D-半乳糖=17:4:10。最后,考察了 Se-OCAPII对H22荷瘤小鼠抗氧化活性的影响。结果表明,Se-OCAPII能够显著升高H22荷瘤小鼠肝脏过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,显著增强H22荷瘤小鼠血液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,显著降低H22荷瘤小鼠肝脏丙二醛(MDA)的含量,通过增强机体分解氧自由基等过氧化物的能力,提高H22荷瘤小鼠的体内抗氧化能力。相同剂量下,Se-OCAPII对H22荷瘤小鼠肝脏中CAT、SOD及血清中GSH-Px的活性提升作用优于OCAPII,对肝脏中MDA含最的降低作用亦优于OCAPII,但成异均无统计学意义。同时,考察了Se-OCAPII对H22荷瘤小鼠肿瘤抑制率及其对H22荷瘤小鼠免疫脏器指数的影响。结果表明,腹腔注射50、100、200mg/(kg·d)的Se-OCAPIIA对H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为32.36%、57.77%和66.24%,各组瘤重与对照组比较均显著降低(P<0.01)。相同剂量下,Se-OCAPII对肿瘤的抑制作用优于OCAPII,但差异无统计学意义。Se-OCAPII对H22荷瘤小鼠脾指数、胸腺指数有一定升高作用。100-200 mg/(kg·d)剂量下,Se-OCAPII组荷瘤小鼠脾指数显著高于对照组(PO.01);200 mg/(kg·d)剂量下,Se-OCAPII组荷瘤小鼠的胸腺指数显著高于对照组;同等剂量下,Se-OCAPII对H22小鼠的胸腺指数和脾指数的升高作用均优于较OCAPII,但差异无统计学意义。综上,本文确定了虎眼万年青多糖的最佳硒化工艺为反应时间8.09h,反应温度71°C,Na2Se03与OCAPIIA质量比0.97g/g,硒含量为3.137mg/g,单糖组成为D-甘露糖:D-葡萄糖:D-半乳糖=17:10:4,形貌主要为球状、絮状。虎眼万年青硒多糖对H22荷瘤小鼠具有较好的抗氧化和抗肿瘤活性,较未硒化多糖有所提升。本研究为为虎眼万年青多糖的进一步开发利用奠定了理论基础。