【摘 要】
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目的:本研究利用小鼠Cre-LoxP技术,在骨细胞中特异性激活Notch信号通路关键调控分子Notch1-NICD,探究骨细胞Notch信号对小鼠骨稳态的调控作用,为研发骨靶向抗骨松药物提供理论依据。方法:1、通过将Notch1-NICDflox/flox基因修饰小鼠（Rosa26启动子和NICD编码序列之间存在一个两侧有LoxP修饰位点的终止盒）与DMP1-8kb-Cre工具鼠（骨细胞表达Cre
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目的:本研究利用小鼠Cre-LoxP技术,在骨细胞中特异性激活Notch信号通路关键调控分子Notch1-NICD,探究骨细胞Notch信号对小鼠骨稳态的调控作用,为研发骨靶向抗骨松药物提供理论依据。方法:1、通过将Notch1-NICDflox/flox基因修饰小鼠（Rosa26启动子和NICD编码序列之间存在一个两侧有LoxP修饰位点的终止盒）与DMP1-8kb-Cre工具鼠（骨细胞表达Cre重组酶）杂交,基因型鉴定出突变鼠(daNICDOt)和同窝对照鼠（ctrl）。2、对出生第一天的乳鼠骨骼进行茜素红染色,分析小鼠胚胎时期的长骨发育状况。3、连续监测小鼠的生长发育情况,计算生存率。4、利用X线骨密度仪检测一月龄小鼠的骨密度变化。5、对小鼠胫骨进行HE染色和TRAP染色,静态骨组织形态学分析一月龄小鼠的松质骨骨量变化,成骨、破骨细胞数量变化等。6、qPCR检测小鼠胫骨骨组织Notch信号靶基因Hes1、Hes5、Hes7、Hey1、Hey2、HeyL;成骨标志基因Alp、Runx2、Osx、Ocn;破骨标志基因Rank L/Opg、M-CSF、cathepsin K、calcitonin receptor、RANK;Wnt信号靶基因Bmp4、Smad6、Lef1、Axin2、Cyclin D1。7、ELISA检测小鼠血清学P1NP和CTX的循环水平。结果:1、基因型鉴定出DMP1-Cre+/-;Notch1-NICDfl/+小鼠(daNICDOt)为激活骨细胞Notch1-NICD的突变鼠,DMP1-Cre-/-;Notch1-NICDfl/+小鼠（ctrl）为对照鼠。2、乳鼠骨骼茜素红染色显示,激活骨细胞Notch1-NICD的突变鼠在胚胎时期长骨生长发育正常,与对照鼠无明显差异。3、激活骨细胞Notch1-NICD的突变鼠出现严重的生长发育障碍,小鼠早死,至35天时小鼠存活率为零。4、X-Ray结果显示,daNICDOt突变鼠的骨密度显著降低（P<0.05）。5、静态骨组织形态学分析结果显示,daNICDOt突变鼠松质骨骨量降低,成骨细胞数量减少,破骨细胞数量增加,皮质骨孔隙率增加（P<0.05）。6、qPCR结果显示,daNICDOt突变鼠骨组织中Notch信号靶基因（Hes1、Hey1、HeyL）表达增高（P<0.05）;成骨标志基因（Alp、Runx2、Osx、Ocn）表达降低（P<0.05）;破骨标志基因（M-CSF、cathepsin K、RANK）表达增高,Rank L/Opg比值增高（P<0.05）;Wnt信号靶基因（Bmp4、Smad6、Lef1、Axin2）表达降低（P<0.05）。7、ELISA结果显示血清学P1NP水平降低,CTX水平增加（P<0.05）。结论:激活骨细胞Notch信号减少成骨细胞、降低成骨分化;增加破骨细胞、增强骨吸收。
其他文献
目的:通过对葛根芩连汤加减治疗湿热中阻型2型糖尿病的临床疗效观察,客观评估其降血糖、改善临床症状的有效性及安全性,为进一步机制研究奠定基础。方法:本研究主要选取就诊于永川区中医院符合纳入标准的60例湿热中阻型2型糖尿病患者为研究对象,按照随机对照原则分成2组,即观察组（30例）、对照组（30例）。对照组给予基础治疗及盐酸二甲双胍缓释片II 0.5g po bid,观察组在对照组的基础上加用中药汤剂
研究背景子宫内膜癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,2012年在世界范围内有约32万例新发病例。子宫内膜癌的发病率和死亡率逐年升高。在美国,2015年有54870位女性被确诊为子宫内膜癌,其中10170名女性死于这一恶性肿瘤,而在2017年有61380例子宫内膜癌新发病例,在妇女所有癌症新发病例中居第四位,其中死亡人数达10920人。子宫内膜癌的预后取决于许多因素,包括肿瘤分期和分级。由于肿瘤复发和转移以
研究背景:软骨组织主要由软骨细胞、基质和纤维等成分构成,目前认为软骨细胞是软骨组织中唯一的细胞。根据所含纤维成分的不同,人们将软骨组织划分三种类型,分别为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨。透明软骨主要见于关节软骨,分布在骨关节表面,机体内分布较为广泛;弹性软骨多见于耳廓鼻翼等部位,质脆;纤维软骨见于脊柱椎间盘,韧性特别大。关节软骨的胶原纤维属于致密结缔组织,软骨细胞分布于胶原纤维框架中,并维持关节软骨
目的:探究使用厚层（5MM）和薄层（1MM）CT图像测量肺结节直径和体积变化的准确性,以得到评估肺结节随访变化的最佳方法。资料与方法:回顾性分析2016年10月至2019年10月经手术病理证实且术前有两次随访CT的251例肺结节患者的临床和影像资料。恶性结节均经病理证实,良性结节经病理或随访消失确认。两名放射科医生分别双盲评估结节的影像特征（密度、形状、分叶、毛刺）,并在两次随访CT的厚层（5MM
三维磁共振成像（3-Dimensional Magnetic Resonance Imaging,3D-MRI）是一种常见的医学成像技术,可以应用于全身各系统的疾病诊断,在医疗领域具有重要应用价值。目前,三维磁共振成像技术的主要不足在于它扫描成像所需的时间较长,检查耗时,因此对于患者来说,不仅扫描时难以在幽闭空间内长时间保持静止状态,而且容易导致患者排队预约时间过长等问题。为了减少扫描成像所需时间
目的:本研究制备了超顺磁性壳聚糖载胰岛素样生长因子结合蛋白5（IGFBP5）纳米粒（SPCIONPs/pIGFBP5）,以研究其作为基因载体的有效性及其生物安全性,用磁场辅助作用下的磁转染系统对骨肉瘤的肺转移进行靶向治疗。方法:用透射电子显微镜、傅里叶变换红外光谱仪、超导量子干涉仪和原子力显微镜对SPCIONPs进行表征;使用CCK8、体内心肝脾肺肾HE染色、血液生化指标检测其体内外生物安全性;使
目的:观察除痰解毒汤（木香、砂仁后下、薏苡仁、红豆杉、白术、陈皮、姜半夏、厚朴、三棱、莪术、茯苓、党参、威灵仙、仙鹤草、鱼腥草、金荞麦、浙贝母）防治结直肠腺瘤术后复发、再发及癌变的作用。方法:将2019年9月-2020年3月在永川中医院住院部患者,将符合纳入标准的60例已行结直肠息肉切除,并且病理活检为腺瘤性息肉的患者,按照随机数字表法分为2组,对照组在术后予常规止血、抗感染、肠道营养等对症治疗;
目的:通过扶正健脾合剂改善肺癌化疗后（肺脾气虚证）免疫功能低下的临床观察,探讨扶正健脾合剂对肺癌化疗后免疫功能及生活质量的影响。方法:将2019年09月至2020年12月期间于重庆市中医院肿瘤血液病科住院部诊治的肺癌化疗后免疫功能低下的患者54例随机分为试验组和对照组,每组各27例,试验组予以扶正健脾合剂治疗,每日2次;对照组予以口服乌苯美司胶囊治疗,每日2次。于治疗前1天、治疗第5天、治疗第10
目的:肺癌治疗后发生复发转移是其主要的死亡原因,CTC（循环肿瘤细胞）已被认为是导致恶性肿瘤复发转移的最直接因素,其数量和上皮间质转化（EMT）分型与预后密切相关。PD-L1是非小细胞肺癌（NSCLC）免疫治疗非常重要的干预靶点,但其在NSCLC CTC中的临床意义及生物学功能有待深入探讨。本研究旨在富集、鉴定和分析NSCLC患者外周血中的CTC,并对其进行基于EMT的不同型别以及PD-L1表达水
黄帝内经（以下简称内经）语言精湛、文化内涵丰富。为了使世界更加了解中医,《内经》的英译也成为许多学者和研究者们的关注焦点。但是,当下关于《内经》英译的研究大多与术语,修辞等有关,缺乏系统理论指导下的特定中医话题英译研究。在此背景下,本文主要结合美国认知科学家Fauconnier和Turner提出的概念整合理论,对《内经》中脉系条文英译进行案例分析。本文以王洪图主编的《黄帝内经》白话解和李照国教授的