RSV NS2与NbFib2互作研究及OsSGS3 RNAi转基因水稻构建

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水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)是纤细病毒属(Tenuivirus)的代表成员,是水稻条纹叶枯病的病原。该病广泛分布于东亚的温带、亚热带地区以及我国的江苏、河南、云南、山东等区域,给水稻生产造成了重大损失。RSV编码的NS2是一个核质穿梭蛋白,通过与本氏烟的核仁蛋白(Fibrillarin2,Fib2)互作来影响RSV的侵染过程,本文在此基础上进一步研究NS2与NbFib2的互作区域。前期研究结果表明,NS2还能与水稻基因沉默抑制子3(suppressor of gene silencing 3,SGS3)互作,拟南芥sgs3突变体对黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)表现出强感病性,本文拟在此基础上研究水稻编码的2个SGS3的亚细胞定位特点,并构建其RNAi转基因植株,为进一步研究OsSGS3在RSV与水稻互作中的作用打下基础。本文主要分为2部分实验。第一部分,研究NS2与NbFib2互作功能域。第二部分,研究OsSGS3-1、OsSGS3-2的亚细胞定位并构建RNAi转基因植株。获得如下结果:1明确了 NS2与NbFib2互作功能域:NS2可以和NbFib2的3个功能域NbFib2-1、NbFib2-2 和 NbFib2-3 互作。2明确了 OsSGS3-1和OsSGS3-2的亚细胞定位:OsSGS3-1能形成球状小点定位在细胞核和细胞质上;OsSGS3-2则主要定位在细胞质中,不形成球状小点。3利用农杆菌介导法进行水稻遗传转化并获得OsSGS3-1-RNAi和OsSGS3-2-RNAi的To代转基因水稻,并通过RT-qPCR对转基因植株进行了鉴定和分析。
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