伴放线放线杆菌外膜蛋白的提取及其生物学作用的初步研究

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ahaulxg
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:提取伴放线放线杆菌外膜蛋白,将不同浓度的外膜蛋白溶液作用于小鼠巨噬细胞,比较不同血清型伴放线放线杆菌外膜蛋白电泳结果的差别,观察不同浓度的外膜蛋白对小鼠巨噬细胞分泌IL-1β的影响。方法:1取3种不同血清型的伴放线放线杆菌粗糙型菌株D7S、SA716和SA1151,培养三天后观察菌落生长状况。2分别培养收集菌细胞,并配置菌细胞悬液,利用SDS-PAGE电泳和考马斯蓝染色方法记录电泳条带的分布。3采用超声破碎及超离心技术提取三种血清型伴放线放线杆菌的外膜蛋白,利用SDS-PAGE电泳和考马斯蓝染色技术分析鉴定三种外膜蛋白的分子量。4使用三种不同浓度的外膜蛋白溶液刺激对数生长期的小鼠巨噬细胞R264.7,设立空白对照组和3个不同浓度外膜蛋白实验组,分别在第12小时和第24小时时采用ELISA检测每孔中IL-1β含量,实验重复3次。spss11.5统计软件分析不同浓度和不同作用时间IL-1β的差异。结果:1粗糙型伴放线放线杆菌在固体培养基下呈单独、成对或是呈小团生长,呈半透明圆形菌落,菌落边缘不规则,紧密贴附在琼脂表面。2全细胞电泳图发现三种菌株的蛋白带在10~200Ku之间分布均匀一致,未见明显差异。3外膜蛋白电泳图发现三种菌株有共同的6种蛋白带,分子量分别是100、75、64、45、34、31Ku;SA1151和SA716存在共同的29Ku蛋白带;D7S和SA716存在共同的27Ku蛋白带;SA1151存在清晰的110Ku蛋白带。4三种不同浓度外膜蛋白溶液产生的IL-1β含量在作用时间为12小时时IL-1β含量有差异(P<0.05),分别为120±4.36pg/ml,110±13.11pg/ml,150±17.69pg/ml;作用时间为24小时时IL-1β含量有差异(P<0.01),分别为80±12.12pg/ml,280±19.31pg/ml,320±20.07pg/ml;不同作用时间下同种浓度外膜蛋白溶液产生IL-1β含量的差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:1伴放线放线杆菌粗糙型菌株在含血液的固体培养基上生长良好,37℃培养2~3天后,即可形成直径约1mm的菌落。2实验中3个血清型伴放线放线杆菌粗糙型菌株之间的全细胞电泳结果未观察到明显差异。3从不同血清型伴放线放线杆菌粗糙型菌株之间的外膜蛋白电泳结果存在一定的差异。4在一定浓度范围内,不同浓度的伴放线放线杆菌外膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞产生的IL-1β含量不同,浓度越高产生的IL-1β含量越高。
其他文献
幽默话语诙谐有趣,蕴含着人们的智慧,给我们带来无限欢乐。本论文以Raskin(1985)提出的幽默语义图式理论(Semantic Script Theory of Humor)为理论依据,探讨儿童文学中的幽默
中国学界通常对富勒自然法思想的理解是片面、不完整的。富勒其实先后提出两种类型的自然法理论:尤那米克斯和程序自然法理论。两者的相同之处在于,其关注的核心都是手段、形
本文通过对30例疤痕子宫中期妊娠引产进行分析,探讨疤痕子宫中期妊娠引产的临床价值及安全可靠性。1资料与方法 1.1一般资料选择我院2005年6月至2007年6月疤痕子宫中期妊娠引产
基于中国传统思想重视情感在维持人类生存和社会存在方面的作用,李泽厚从伦理学方面探讨了“情”作为“本体”、作为人生的根本实在的维度。李泽厚通过对道德本质、人类道德
习近平总书记在主持中共中央政治局集体学习强调指出,各级党委要结合正在开展的"三严三实"专题教育,继续抓好党的政治纪律和政治规矩集中教育,继续落实中央八项规定精神,继续查
在农业信息服务平台中,涉及到大量信息的存储、查询和修改。这就需要有一个独立的模块来负责管理这些信息,这个模块就是内容管理系统。内容管理是当前信息化建设领域的热点。
在日益激烈的市场竞争中,传统的以产品为中心的市场战略逐步被以客户为中心、以服务为目标的市场战略所取代,企业面临前所未有的市场化和客户个性化的挑战。先进的信息化系统
ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
电子i角是评定数字水准的重要指标,它的测量结果不确定度评定也尤为重要。本文主要阐述了数字水准仪的测量原理、光学i角与电子i角的关系,并通过野外检定方法对数字水准仪电子i角的误差来源进行综合分析,并对电子i角的测量结果不确定度进行计算。