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为了提升宠物临床肿块性疾病的鉴别诊断水平,分别在超声影像学与分子生物学水平上对犬肿块性疾病进行应用研究。重点开展超声弹性成像技术、P53基因对宠物犬肿块性疾病鉴别诊断上的研究,并进一步探索上述两种新兴诊断技术在宠物临床的应用价值。本文以宠物犬为研究对象,以期为宠物临床肿块性疾病的鉴别诊断提供一定的依据和理论指导。 试验选取宠物临床符合要求的犬肿块病例18例进行超声影像学研究,对获得的病例进行统计学分析,同时根据超声声像图采集方法和分析原则对18例肿块病例进行超声技术鉴别诊断,利用组织病理切片方法对18例肿块病例进行分析。实验基地饲养的雌性健康标准比格犬6只作为阳性对照,收集的宠物临床8例雌性犬恶性乳腺肿瘤样本作为阳性组,利用普通PCR对乳腺组织中P53基因进行半定量测定分析,利用实时荧光定量(real time Q-PCR)方法从RNA水平上定量测定P53基因的表达水平。 宠物临床上犬肿块性疾病的发生在年龄、性别、品种以及发病部位上有着一定的规律可循。超声弹性成像系统中,应用超声弹性成像技术诊断肿块良恶性的准确率为94.4%(17/18)。单一根据弹性评分、应变比值、弹性面积比值三者中的一项诊断肿块良恶性与三者联合应用诊断肿块良恶性,结果比较应变比值(88.9%)与综合结果比较差异不显著(P=0.06,P>0.05),弹性评分(66.7%)、弹性面积比值(72.2%)与综合结果比较差异极显著(P<0.01)。应用传统超声技术(即二维灰阶超声、彩色血流多普勒超声)判定肿块良恶性的准确率分别为33.3%、55.5%,传统超声技术与超声弹性成像技术结果比较差异极显著(P<0.01)。利用PCR测定结果表明,实验组与阴性对照组相比,实验组凝胶电泳成像基因条带的亮度与宽度明显较高;实时荧光定量PCR结果显示,阴性对照组中,P53基因与GAPDH基因的CT值结果均大于12.5,实验组中,P53基因与GAPDH基因的CT值结果均小于10;结果分析表明,恶性乳腺肿瘤组织中P53基因表达量,与正常乳腺组织中的P53基因表达量差异均显著,其中3号差异显著(P<0.05),其余差异均极显著(P<0.01)。 结果表明:超声弹性成像技术在鉴别犬肿块良恶性方面与传统超声技术相比有着明显的特异性和准确性,该技术可作为今后宠物临床犬肿块良恶性的一种重要鉴别方法。P53基因表达水平可作为未来宠物临床监测犬乳腺肿块性疾病的一项重要分子水平指标。