论文部分内容阅读
背景与目的胃癌(Gastric cancer, GC)是全世界发病率最高的恶性肿瘤之一。近期已经证明某些原癌基因、抑癌基因、microRNA和胃癌的发生发展有着密不可分的关系,对于肿瘤的发生发展深层次潜在的分子机制尚待进一步研究。CEP55(Centrosomal protein55)是最新发现的中心体相关蛋白家族成员,这一蛋白家族具有调节细胞周期的功能。现已发现CEP55某些肿瘤组织中表达上调,例如肝细胞肝癌。先前已经有人发现CEP55在肿瘤的发生中起到关键性作用。然而,CEP55在胃癌发病机制中所起的作用依然不清楚。因此,明确CEP55在胃癌组织标本和细胞中的表达水平,探讨CEP55影响胃癌恶性生物学行为的具体分子机制成为我们的目标。方法通过实时定量PCR方法检测胃癌组织以及胃癌细胞系中的CEP55mRNA水平,利用蛋白免疫印迹法(western blot)和免疫组织化学技术检测胃癌组织中CEP55的蛋白表达。此外,对胃癌细胞系中CEP55基因进行过表达和干扰,同时将处理过的细胞系与空白对照组的细胞增殖和克隆形成进行比较,观察CEP55对胃癌细胞系增殖能力的的影响。最后,裸鼠皮下种瘤实验验证了CEP55在体内对胃癌细胞系的增殖起到了促进作用。结果我们发现CEP55在人类胃癌组织和胃癌细胞中高表达现象,预示着CEP55在胃癌的发生发展中起到重要作用。CEP55的异常高表达促进了胃癌细胞的增殖、克隆形成能力以及成瘤能力,同时干扰CEP55后的胃癌细胞抑制了这些生物学行为。在此基础上我们进一步的发现,CEP55介导的这种细胞的转化是通过PI3K/AKT/p21信号通路实现的。过表达CEP55后的胃癌细胞系增加了磷酸化AKT的表达同时抑制了p21WAF1/Cip1的表达,并且干扰CEP55后的胃癌细胞增殖受到抑制是由于细胞周期被阻滞在细胞周期中的G2/M期。结论与正常对照组相比较,在胃癌组织中CEP55的表达更高。CEP55mRNA和蛋白在胃癌组织中的表达明显高于癌旁非肿瘤组织,CEP55在体外能够促进胃癌细胞的增殖、克隆形成、成瘤能力,CEP55介导的促进胃癌细胞的增殖是通过PI3K/AKT/p21信号通路实现的本研究为CEP55成为胃癌潜在的治疗靶点提供了可能的依据。